Methylenová modř - Výukový materiál

Methylenová modř (MB) je chemická sloučenina (3,7-bis(dimethylamino)-fenothiazin-5-chlorid sodný) s širokým spektrem lékařských aplikací [1]. Poprvé ji vyrobil Heinrich Caro jako textilní barvivo, ale vědci brzy zjistili, že by mohla být užitečná i v medicíně.

První studie ukázaly, že MB lze použít jako lékařské barvivo k osvětlení buněk pod mikroskopem, a později vědci jako Ehrlich a Guttman zjistili, že je účinný při léčbě malárie. Díky tomuto objevu se MB stal důležitým lékem v mnoha vojenských kampaních, přestože měl zvláštní vedlejší účinek, že zbarvoval moč do modra. Ačkoli tento vedlejší účinek nebyl u vojáků oblíbený, měl překvapivé využití v psychiatrii. Lékaři přidávali MB k lékům, aby kontrolovali, zda pacienti užívají předepsané léky, protože modrá barva moči potvrzovala jejich dodržování [2, 3].

Nakonec vědci zjistili, že MB má sám o sobě sedativní účinek, což vedlo k jeho využití v psychiatrické léčbě a přispělo k vývoji prvních antipsychotik.

MB je v současné době schválen Úřadem pro kontrolu potravin a léčiv k léčbě methemoglobinémie, poruchy krvetvorby, při níž je narušen přísun kyslíku, a používá se také k léčbě ifosfamidem indukované encefalopatie, což je vedlejší účinek některých protinádorových terapií.

Mezi další použití MB patří léčba infekcí močových cest u starších pacientů, malárie u dětí a případy vazoplegického šoku, kde selhala léčba adrenalinem. Kromě terapeutického použití se MB běžně používá jako stopovací barvivo v chirurgii, které pomáhá vizualizovat tkáně [1-3].

V posledních letech se methylenová modř intenzivně zkoumá z hlediska jejího potenciálu v neurologické léčbě, kdy se ukazuje její přínos při léčbě psychóz a zlepšování paměti a kognitivních funkcí u stavů, jako je Alzheimerova choroba.

Methylenová modř pro zdraví mozku (studie na lidech a zvířatech)

Nedávné studie ukázaly, že methylenová modř (MB) může pomoci při onemocněních souvisejících s mozkem tím, že chrání neurony, zvyšuje antioxidační aktivitu a zlepšuje funkci mitochondrií. MB se původně používala v jiných lékařských terapiích, zlepšuje paměť, chrání mozkové buňky a snižuje zánět u nemocí, jako je Alzheimerova choroba, poranění mozku a mrtvice. Podporuje energii mozku a bojuje proti oxidačnímu stresu, což z něj činí užitečnou volbu pro zdraví a ochranu mozku.

MB se účinně dostává do mozku, zejména po intravenózním podání, které poskytuje vyšší koncentrace než perorální dávky. MB se hromadí v různých tkáních, včetně mozku, kde může být jeho hladina až desetkrát vyšší než v krvi, a to již během jedné hodiny po podání. V těle se rychle šíří do plic, jater, ledvin a srdce. Vědci také vyvinuli modifikovanou formu MB, která ještě lépe proniká do mozku a v současné době se testuje v klinických studiích.

Studie na lidech i zvířatech prokázaly, že methylenová modř podporuje zdraví mozku různými způsoby. Patří mezi ně zvýšení funkce mitochondrií, zlepšení metabolismu kyslíku a ochrana před úbytkem kognitivních funkcí souvisejících s věkem. V klinické studii Rodriguez et al (2016) provedli randomizovanou, dvojitě zaslepenou klinickou studii s cílem posoudit účinky MB na pozornost a paměť u zdravých jedinců. Po podání nízkých dávek MB odhalila funkční magnetická rezonance zvýšenou aktivitu v mozkových oblastech spojených se zpracováním pozornosti a paměti, jako je ostrovní kůra a prefrontální kůra. Zajímavé je, že účastníci vykazovali také 7% zlepšení přesnosti vyhledávání v paměti [4]. Tyto výsledky potvrzují potenciál MB zlepšit mozkové funkce a paměť u zdravé populace.

Kromě toho Rodriguez et al (2017) v jiné studii zjistili, že MB snižuje průtok krve v určitých oblastech mozku souvisejících s úkolem. Ještě důležitější je, že MB posílil spojení v oblastech souvisejících s vnímáním a pamětí během odpočinku [5]. To naznačuje, že MB může modulovat mozkové sítě a potenciálně zlepšovat kognitivní funkce. Kromě toho Telch et al (2014) provedli klinickou studii na lidech, která zkoumala účinky MB na vymizení strachu a paměť. Dospělým s klaustrofobií bylo náhodně přiděleno 260 mg MB nebo placebo bezprostředně po sezeních expoziční terapie [6]. O měsíc později účastníci, kteří měli zpočátku nízkou úroveň strachu, vykazovali významně menší strach, pokud dostávali MB ve srovnání s placebem. MB také zlepšil náhodnou kontextovou paměť, což naznačuje lepší uchování paměti. U osob s vyšší úrovní strachu po tréninku však došlo k menšímu přínosu nebo dokonce ke zhoršení, což naznačuje, že MB může být nejúčinnější, pokud je podáván po úspěšné expoziční terapii.

Alda et al (2017) dále provedli šestiměsíční dvojitě zaslepenou zkříženou studii, ve které zkoumali metylenovou modř (MB) jako doplňkovou léčbu reziduálních příznaků u bipolární poruchy [7]. Třicet sedm účastníků léčených lamotriginem dostávalo buď nízkou dávku (15 mg), nebo aktivní dávku (195 mg) MB. Studie ukázala, že aktivní dávka (195 mg) MB významně snížila depresivní příznaky na Montgomeryho-Åsbergově i Hamiltonově škále (P = 0,02 a P = 0,05). Příznaky úzkosti se rovněž významně zlepšily (P = 0,02), zatímco příznaky mánie zůstaly po celou dobu stabilní. Přestože MB neměla významný vliv na kognitivní příznaky, byla dobře snášena s mírnými vedlejšími účinky. Tato zjištění naznačují potenciál MB při zmírňování deprese a úzkosti u bipolární poruchy, pokud se používá vedle standardní léčby.

Domínguez-Rojas et al (2022) referovali o použití MB jako život zachraňující terapii u dětského pacienta s refrakterním septickým šokem způsobeným listeriovou meningitidou [8]. MB rychle zlepšil hemodynamiku, umožnil účinné vysazení vazopresorů a normalizaci hladiny laktátu. Ačkoli měl pacient neurologické následky spojené s meningitidou, nebyly zaznamenány žádné nežádoucí účinky MB. Tento případ poukazuje na potenciál MB v léčbě závažné vazoplegie v případě selhání jiných léčebných postupů, ačkoli je zapotřebí dalšího výzkumu.

V jiné případové studii Gharaibeh et al (2019) zkoumali režim prevence ifosfamidem indukované encefalopatie (IIE) u pacienta s rakovinou [9]. Režim kombinoval metylenovou modř (50 mg každých 6 hodin), thiamin a hydrataci před chemoterapií. MB účinně snížila neurologické komplikace a umožnila pacientovi dokončit chemoterapii bez významné encefalopatie. Tento případ ukazuje potenciální roli MB v prevenci IIE a usnadnění probíhající onkologické léčby.

Ve studii Gureeva a kol. z roku 2016 vědci zjistili, že léčba myší methylenovou modří po dobu 60 dnů snižuje s věkem související pokles fyzické aktivity, průzkumu a úzkostného chování [10]. Léčba také zvýšila množství reaktivních forem kyslíku (ROS) v mozkových mitochondriích, což aktivovalo signální dráhu Nrf2/ARE. Tato aktivace zlepšila biogenezi a funkci mitochondrií a obnovila důležité mitochondriální geny, jako jsou NRF1, MTCOX1, TFAM a SOD2, čímž se zvýšila celková odolnost mitochondrií. Tyto výsledky zdůrazňují potenciál methylenové modři jako ochranného prostředku proti úpadku mozku souvisejícímu s věkem. V jiné studii na zvířatech Riha et al (2005) hodnotili účinky různých dávek MB na paměť a spotřebu kyslíku v mozku u potkanů [11]. Optimální byla dávka 4 mg/kg, která zlepšila rozpoznávání objektů a habituaci bez vedlejších behaviorálních účinků, zatímco vyšší dávky měly nespecifické účinky. MB také zvyšoval spotřebu kyslíku v mozku v závislosti na dávce, což koreluje se zvýšeným uchováním paměti. Výsledky potvrzují, že MB zlepšuje paměť ovlivněním metabolismu kyslíku v mozku.

Callaway et al (2004) dále studovali účinky methylenové modři na mitochondriální aktivitu a paměť u potkanů [12]. Nízká dávka 1 mg/kg významně zvýšila aktivitu cytochrom c oxidázy 24 hodin po injekci a zlepšila retenci prostorové paměti. Potkani léčení MB vykazovali 66% správných odpovědí v bludišti ve srovnání s 31% u kontrolní skupiny. Tato zjištění naznačují schopnost MB zlepšit kognitivní funkce zvýšením účinnosti mitochondrií.

Lin et al (2012) dále zkoumali účinky MB na mitochondriální funkce a metabolismus mozku in vitro a na zvířecích modelech [13]. Výsledky ukázaly, že MB zvyšuje mitochondriální spotřebu kyslíku, příjem glukózy a průtok krve mozkem (CBF), zejména v hipokampu a motorické kůře. Bylo zjištěno, že za podmínek s nízkým obsahem kyslíku MB zvyšuje extrakci kyslíku (OEF) o 49% a snižuje oxidační poškození spojené s ischemickou cévní mozkovou příhodou. Tato zjištění podporují MB jako látku zvyšující mozkový metabolismus s potenciálním využitím u neurodegenerativních onemocnění a při zotavování po mrtvici. V jiné studii, Tucker et al (2018) se zabývali úlohou methylenové modři při podpoře mitochondriální funkce a neuroprotekce. MB působí v mitochondriích jako "redoxní cyklovač" a pomáhá buňkám účinněji produkovat energii, i když jsou některé mitochondriální dráhy narušeny. Snižuje oxidační stres a zvyšuje antioxidační obranyschopnost [14]. Klinicky se MB používá k léčbě methemoglobinémie tím, že obnovuje normální funkci hemoglobinu, jak je vidět v případech, jako je rodina "Blue Fugates".

V jiné studii Wrubel et al (2007) prokázali potenciál MB zlepšit učení a paměť díky jeho metabolickým účinkům [15]. V dávce 1 mg/kg se potkani, kterým byl podáván MB, naučili během tří dnů rozlišovat mezi dírami s návnadou a bez návnady, na rozdíl od kontrol, kterým byl podáván fyziologický roztok. Studie také spojovala kognitivní účinky MB se zvýšenou aktivitou cytochrom c oxidázy, klíčového mitochondriálního enzymu, která byla u potkanů léčených MB o 70% vyšší. Tyto výsledky naznačují, že MB zlepšuje uchovávání paměti zvýšením energetického metabolismu mozku, což z něj činí slibnou intervenci při řešení problémů s učením.

Haouzi et al (2020) navíc hodnotili MB jako léčbu otravy sirovodíkem (H2S), která způsobuje vážné poškození mozku a srdce [16]. Redoxní vlastnosti MB pomáhají obnovit produkci energie v mitochondriích a působí proti účinkům H2S, který blokuje normální buněčné procesy. Ve studiích na zvířatech MB snížil neurologické poškození, zlepšil motorické schopnosti a snížil úmrtnost. Schopnost MB obnovovat využití kyslíku a snižovat reaktivní formy kyslíku (ROS) jej staví do pozice potenciálního univerzálního antidota proti mitochondriálním toxinům, jako je H2S a kyanid. Zhang et al (2006) navíc zkoumali neuroprotektivní účinky MB na modelu neuropatie zrakového nervu vyvolané rotenonem, který simuluje mitochondriální dysfunkci pozorovanou u onemocnění, jako je Leberova neuropatie zrakového nervu [17]. Rotenon způsobil významnou ztrátu buněk sítnice, ale současná léčba MB v různých dávkách této degeneraci zabránila v závislosti na dávce. Bylo zjištěno, že MB zvrátil oxidační stres a obnovil spotřebu kyslíku narušenou rotenonem. Tyto výsledky naznačují potenciál MB jako terapeutického prostředku u neuropatie zrakového nervu a dalších neurodegenerativních stavů spojených s mitochondriální dysfunkcí.

Singh et al (2023) ve své studii zkoumali účinky methylenové modři (MB) na metabolismus mozku u lidí a potkanů pomocí zobrazovacích metod k měření průtoku krve a metabolických změn [18]. MB byl podáván intravenózně v dávkách 0,5 a 1 mg/kg u lidí a 2 a 4 mg/kg u potkanů. Překvapivě MB snížil globální mozkový průtok krve a metabolismus kyslíku u lidí i metabolismus glukózy u potkanů, přičemž účinky byly závislé na dávce. Tato zjištění poukazují na potenciální hormetický účinek, kdy MB ve vyšších dávkách může spíše inhibovat než stimulovat metabolismus. Studie naznačuje, že metabolické účinky MB mohou být výraznější v podmínkách narušeného metabolismu mozku než u zdravých osob.

Rojas et al (2009) navíc zkoumali účinek MB na poškození vyvolané neurotoxiny u potkanů [19]. Při současném podávání s rotenonem (Rot), neurotoxinem, který způsobuje "metabolické mrtvice" ve striatu, MB významně snížil velikost lézí a oxidační stres. MB také zachoval aktivitu cytochromoxidázy v oblastech mozku souvisejících s motorikou a udržel konektivitu v bazálních gangliích-thalamokortikálních okruzích. Z behaviorálního hlediska MB zlepšil motorickou asymetrii způsobenou Rot. Tyto výsledky potvrzují neuroprotektivní roli MB tím, že snižuje oxidační stres, zachovává energetický metabolismus a chrání nervové sítě.

Gonzalez-Lima a Bruchey (2004) navíc zjistili, že MB hraje významnou roli při zlepšování paměti na vyhasínání strachu u potkanů [20]. MB (4 mg/kg, intraperitoneálně) byl podáván denně po dobu pěti dnů po tréninku extinkce, což vedlo k významně nižším mrazivým reakcím na podmíněné zvuky ve srovnání s kontrolní skupinou. MB také zvýšil metabolickou aktivitu mozku v klíčových prefrontálních oblastech, jako je infralimbická kůra, což koreluje s lepším uchováním paměti. To naznačuje, že MB zlepšuje extinkční paměť zvýšením energetického metabolismu mozku a aktivity cytochromoxidázy.

Bhurtel et al (2018) dále zkoumali účinky MB na modelech Parkinsonovy choroby (PD) s použitím neurotoxinů MPTP a MPP+ [21]. Předléčení MB významně snížilo ztrátu dopaminergních neuronů, aktivaci glií a nedostatek dopaminu. Zvýšila také hladinu neurotrofického faktoru odvozeného od mozku (BDNF) a aktivovala signální dráhu Erk, která je důležitá pro přežití neuronů a produkci dopaminu. Zablokování těchto drah zvrátilo ochranné účinky MB, což zdůrazňuje jejich význam pro neuroprotekci zprostředkovanou MB.

Abdel-Salam et al (2014) dále hodnotili neuroprotektivní účinek methylenové modři (MB) proti poškození vyvolanému rotenonem u potkanů [22], což je model Parkinsonovy choroby. Rotenon (1,5 mg/kg, třikrát týdně) způsobil významný oxidační stres, zánět, apoptózu a ztrátu dopaminergních neuronů. Současné podávání MB (5, 10 nebo 20 mg/kg denně) snížilo markery oxidačního stresu, jako je malondialdehyd (MDA) a oxid dusnatý (NO), obnovilo hladiny antioxidantů, jako je glutathion, a zvýšilo ochranné enzymy (AChE a PON1). MB také snížil markery zánětu (TNF-α) a apoptózy (kaspáza-3) a zároveň zachoval dopaminergní neurony. Tato zjištění naznačují, že MB chrání před oxidativním poškozením, zánětem a ztrátou neuronů v modelech Parkinsonovy choroby.

V jiné studii Abdel-Salam et al. (2016) byli potkani vystavení malathionu, pesticidu, který způsobuje významný oxidační stres a poškození mozku, léčeni MB (5 nebo 10 mg/kg) [23]. Malathion zvýšil peroxidaci lipidů (MDA o 32,8%), hladinu oxidu dusnatého (o 51,4%) a degeneraci neuronů. Bylo zjištěno, že současné podávání MB významně snižuje oxidační stres, obnovuje hladiny antioxidantů (GSH se zvýšil až o 67,7%) a zlepšuje aktivitu enzymů (PON1 o 30,9%). Histopatologie ukázala, že MB minimalizoval poškození neuronů a aktivaci gliových buněk. Tyto výsledky naznačují potenciál MB působit proti neurotoxicitě způsobené expozicí pesticidům.

V roce 2016. Abdel-Salam a kol. také zkoumali účinky MB na oxidační stres a poškození mozku způsobené toluenem, neurotoxickým rozpouštědlem [24]. Vystavení toluenu zvýšilo markery oxidačního poškození, snížilo hladinu glutathionu (GSH) a vyvolalo zánět (zvýšený NF-κB). Léčba MB snížila markery oxidačního stresu (MDA, dusitany), snížila zánět a obnovila hladiny neurotrofického faktoru (BDNF). Inhibovala také apoptotické dráhy snížením aktivity kaspázy-3 a zlepšila funkci gliových buněk (normalizovala hladiny GFAP). Tyto výsledky naznačují, že MB chrání před neurotoxicitou vyvolanou chemickými látkami tím, že snižuje oxidační stres, zánět a buněčnou smrt.

V jiné studii na zvířatech Wu et al (2024) prokázali, že methylenová modř (MB) účinně zmírňuje kognitivní a neuronální poškození způsobené opakovanou neonatální expozicí izofluranu (ISO) u potkanů [25]. MB podávaný v dávce 1 mg/kg intraperitoneálně třikrát před každou expozicí ISO zlepšil učení a paměť v behaviorálních testech, jako je Barnesovo bludiště. Snížil také poškození neuronů, apoptózu, fragmentaci mitochondrií a neurozánět a zároveň zachoval integritu hematoencefalické bariéry. Tato zjištění podporují MB jako slibnou intervenci na ochranu vyvíjejícího se mozku před poškozením způsobeným anestezií. Goma et al (2021) dále zkoumali ochrannou roli MB proti neurotoxicitě vyvolané nanočásticemi oxidu měďnatého (CuO-NP) u potkanů [26]. MB (1 mg/kg) zachoval neurobehaviorální funkce, snížil oxidační poškození a zabránil mitochondriální dysfunkci a apoptóze neuronů. Významně působil proti toxickým účinkům CuO-NPs, včetně zvýšených markerů oxidačního stresu a poškození mozku. Tyto výsledky naznačují antioxidační a mitochondriální ochranný potenciál MB proti neurotoxinům životního prostředí.

Methylenová modř při poruchách nálady

Výzkum naznačuje, že methylenová modř (MB) může pomoci při léčbě poruch nálady, jako jsou deprese a úzkost. Narsapur a Naylor (1983) byli jedni z prvních, kteří studovali MB u pacientů s maniodepresivní psychózou, kteří nereagovali na standardní léčbu [27]. Zjistili, že u 14 z 22 pacientů došlo ke zlepšení po perorálním užívání MB (100 mg dvakrát nebo třikrát denně) a u dvou pacientů se projevil krátkodobý přínos intravenózního MB. Později Naylor et al (1986) provedli dvouletou studii, v níž srovnávali nízkou dávku MB (15 mg/den) s vyšší dávkou (300 mg/den) [27]. Vyšší dávka významně snížila depresivní příznaky, ale i nízká dávka snížila počet hospitalizací, což svědčí o přínosu i při nižších dávkách.

Jiná studie Naylora et al (1987) potvrdila, že MB v dávce 15 mg/den pomohl zmírnit těžkou depresi u 35 pacientů [27]. Studie na zvířatech dále potvrzují antidepresivní a protiúzkostné účinky MB. Eroglu a Caglayan (1997) zjistili, že MB zlepšuje symptomy u potkanů v dávkách 7,5-30 mg/kg, ale vyšší dávky (60 mg/kg) byly méně účinné a vykazovaly křivku odpovědi ve tvaru písmene U [27].

Podobně Kurt et al (2004) zjistili, že MB zvrátil úzkost vyvolanou sildenafilem u potkanů. Guimarães et al (1994) a de-Oliveira a Guimarães (1999) prokázali, že injekce MB do specifických oblastí mozku snižuje úzkost v závislosti na dávce [27]. Slibný je také výzkum analogů MB. Harvey et al (2010) ukázali, že methylenová zeleň, podobná sloučenina, má u zvířat antidepresivní účinky jako MB [27]. Delport et al (2014) zjistili, že lazurit B (metabolit MB) a ethylthionin chlorid (ETC) snižují chování podobné depresi u potkanů bez významné inhibice MAO-A, což naznačuje méně vedlejších účinků [27]. Tyto studie také ukázaly, že MB zřejmě působí prostřednictvím více mechanismů, včetně inhibice MAO-A, posílení mitochondrií a modulace dráhy NO.

Methylenová modř podporuje mitochondriální funkce u mozkových/neurologických poruch

Mitochondriální dysfunkce je klíčovým faktorem mnoha mozkových onemocnění, které vedou k zánětu, oxidačnímu stresu a nedostatku buněčné energie [28]. Methylenová modř (MB), lék schválený FDA, který se tradičně používá u stavů, jako je methemoglobinémie a otrava kyanidem, nedávno prokázal potenciál při řešení těchto mitochondriálních problémů u neurologických stavů.

MB působí jako pomocník mitochondriálních částí buněk produkujících energii. Jeho činnost spočívá v přenosu elektronů v mitochondriálním elektronovém transportním řetězci, zejména v případě zablokování komplexu I a komplexu III [28]. Tento účinek pomáhá obnovit normální tok elektronů, což umožňuje mitochondriím účinněji produkovat energii. MB tak snižuje produkci škodlivých molekul zvaných reaktivní formy kyslíku (ROS), které jsou často zodpovědné za poškození buněk a záněty.

U nemocí, jako je Alzheimerova choroba, Parkinsonova choroba, mrtvice a traumatické poranění mozku (TBI), jsou mitochondriální dysfunkce a energetické deficity běžné.

Zde se dozvíte, jak může společnost MB v těchto případech pomoci:

• Alzheimerova choroba (AD): Bylo prokázáno, že MB snižuje hladinu proteinů beta-amyloidu, které jsou spojovány s Alzheimerovou chorobou [28]. To zabraňuje interferenci těchto proteinů s mitochondriálními enzymy a pomáhá zachovat mitochondriální funkci. MB také inhibuje shlukování tau proteinů, dalšího charakteristického znaku AD, a bylo pozorováno, že zlepšuje paměť a kognitivní funkce jak ve studiích na zvířatech, tak v klinických studiích na lidech.
• Traumatické poškození mozku (TBI): Po TBI může MB snížit otok mozku, chránit hematoencefalickou bariéru a snížit odumírání buněk v mozku [28]. Studie ukázaly, že nízké dávky MB podávané brzy po poranění mohou významně zlepšit přežití neuronů a podpořit regeneraci zlepšením funkce mitochondrií a produkce energie.
• Mrtvice: U modelů ischemické cévní mozkové příhody MB zlepšuje aktivitu klíčových mitochondriálních komplexů, zvyšuje příjem glukózy a spotřebu kyslíku [28]. Tyto účinky pomáhají obnovit energetickou rovnováhu v mozkových buňkách a zmenšit oblast poškození po mrtvici.
• Parkinsonova choroba: MB prokázal ochranný účinek na neurony produkující dopamin postižené Parkinsonovou chorobou [28]. Snížením oxidačního stresu a podporou zdraví mitochondrií pomáhá MB zachovat funkci neuronů v modelech, kde jsou přítomny mitochondriální toxiny.

Potenciál MB zvyšovat účinnost mitochondrií, snižovat oxidační stres a zlepšovat produkci buněčné energie z něj činí slibnou možnost léčby různých mozkových poruch spojených s mitochondriálními problémy. Jeho schopnost procházet hematoencefalickou bariérou a působit na neuronální mitochondrie zvyšuje jeho terapeutický potenciál.

Methylenová modř u Alzheimerovy choroby (studie na lidech a zvířatech)

Methylenová modř aktivně bojuje proti agregaci tau, chrání mitochondrie a zlepšuje kognitivní funkce, což z ní činí potenciálního kandidáta na léčbu Alzheimerovy choroby.

Předklinické a klinické studie prokazují jeho schopnost zpomalit progresi onemocnění, zejména v kombinaci s pokročilými metodami podávání nebo optimalizovaným dávkováním. Ve studii Liu et al (2024) vyvinuli optimalizovaný přístup využívající methylenovou modř (MB) v kombinaci s černým fosforem (BP) v boji proti Alzheimerově chorobě (AD) [29]. MB, inhibitor agregace tau, byl podáván intranazálně pomocí hydrogelové formulace na bázi BP. Tato metoda obešla hematoencefalickou bariéru (BBB), čímž zajistila trvalé uvolňování a přímé dodání do mozku. Na myších modelech tato strategie inhibovala agregaci tau, obnovila funkci mitochondrií, snížila zánět nervového systému a zlepšila kognici. Tato zjištění naznačují potenciál MB v boji proti Alzheimerově chorobě, zejména v kombinaci s pokročilými systémy pro doručování léčiv.

Zakaria et al (2016) dále hodnotili schopnost MB chránit mitochondrie před toxicitou beta-amyloidu (Aβ), který je klíčovým faktorem progrese AD [30]. Konkrétně MB snižoval hladinu Aβ a jeho vazbu na alkoholdehydrogenázu vázající amyloid (ABAD), čímž zachovával mitochondriální funkci. Kromě toho MB zlepšil přežívání buněk, snížil oxidační stres a obnovil hladiny estradiolu, hormonu nezbytného pro zdraví mozku. Tyto účinky zdůrazňují úlohu MB při ochraně neuronů a zpomalení progrese AD.

Wilcock et al (2018) během klinické studie zkoumali leuko-methylthionin (LMTM), formu MB, jako samostatnou léčbu mírné formy AD ve studii fáze III [31]. U pacientů, kteří dostávali LMTM (100 mg nebo 4 mg dvakrát denně), došlo k významnému zlepšení kognitivních a funkčních výsledků, snížení mozkové atrofie a zvýšení příjmu glukózy. Zajímavé je, že nízké dávky (4 mg) byly stejně účinné jako vyšší dávky, což z LMTM činí slibnou a bezpečnější terapeutickou možnost pro AD.

Kromě toho Wischik et al (2015) provedli studii na 321 pacientech s mírnou až středně těžkou formou Alzheimerovy choroby s cílem posoudit optimální dávkování methylthioninu (MT, účinné látky v MB) [32]. Identifikovali optimální denní dávku 138 mg MB, neboť tato dávka významně zlepšila kognitivní výkonnost a mozkový krevní průtok a zachovala si přínos po dobu 50 týdnů. Naopak vyšší dávky (228 mg/den) byly méně účinné kvůli problémům s absorpcí, což zdůrazňuje význam optimalizace dávky při terapii založené na MB. Bylo prokázáno, že MT inhibuje agregaci tau proteinu a snižuje tau patologii v preklinických modelech. Tím, že se MT zaměřuje na tento charakteristický znak AD, nejen zpomaluje pokles kognitivních funkcí, ale také chrání před neurodegenerací. Klinické studie podporují jeho roli jako inhibitoru agregace tau a zdůrazňují jeho potenciál modifikovat progresi AD.

MB navíc přechází mezi svou redukovanou formou, leukomethylthioneinem (LMT), a svou oxidovanou formou, která se stabilizuje jako methylthionein chlorid (MTC). V klinických studiích, zejména ve studii fáze 2, byla zjištěna účinnost MTC v dávce 138 mg/den. Zlepšoval kognitivní funkce a výsledky zobrazování mozku u pacientů s mírnou až středně těžkou formou Alzheimerovy choroby. Vyšší dávka 228 mg/den však nevykazovala stejnou účinnost, což bylo přičítáno problémům s rozpouštěním a vstřebáváním léčiva. Aby se zlepšilo podávání léku, vyvinuli vědci nové složení LMTX, které zajišťuje stabilní podávání LMT a vykázalo konzistentnější výsledky v preklinických i klinických studiích. Toho si všimli ve studii Baddeley et al (2015), kteří upozornili na důležitou roli včasného uvolnění MT v žaludku pro jeho účinnost [33].

Další výzkum potvrdil potenciál MB nejen pro léčbu psychiatrických stavů, ale i širších neurodegenerativních onemocnění, jako je Alzheimerova choroba. MB může zlepšit zdraví mozku posílením hematoencefalické bariéry, snížením zánětu a podporou funkce mitochondrií. Klinické studie, jako například ta, na kterou upozornil Alda (2019), ukázaly smíšené výsledky, nicméně specifické dávky, jako například 138 mg, které se ukázaly jako prospěšné v jedné studii, vykazovaly pozitivní účinky na kognitivní funkce i po 50 týdnech [34].

Atamna a Kumar (2010) dále v přehledu hodnotili možné mechanismy účinku MB u AD [35]. Jako například jeho schopnost zlepšovat zdraví mitochondrií a chránit před toxicitou amyloidu-β - ústřední problémy u AD. MB usnadňuje funkci mitochondrií a snižuje oxidační stres. Kromě toho kombinace MB s osmolity, jako je karnosin, může poskytnout dvojí přístup k boji proti AD tím, že stabilizuje proteiny a zabraňuje škodlivé agregaci amyloidu-β.

Medina et al (2011) provedli další důležitý nález na myších 3xTg-AD [36]. Zjistili, že MB nejen snižuje hladinu amyloidu-β, ale také zlepšuje paměť a schopnost učení. To přičítali schopnosti MB stimulovat aktivitu proteazomu, což pomáhá odstraňovat škodlivé proteiny a nabízí potenciální terapeutickou cestu pro léčbu AD.

Také Auchter et al (2014) hodnotili potenciál MB při zlepšování kognitivních funkcí narušených sníženým průtokem krve do mozku, což je rizikový faktor Alzheimerovy choroby [37]. V jejich studii byla potkanům, kteří byli vystaveni okluzi krční tepny simulující snížený průtok krve mozkem, podávána nízká denní dávka 4 mg/kg MB. Léčba u těchto potkanů významně zlepšila paměť a učení. Tyto výsledky ukazují potenciál MB zlepšit využití energie v mozku a podpořit kognitivní funkce v náročných podmínkách. Paban et al (2014) navíc provedli studii na transgenním myším modelu AD [38]. Zkoumali, zda MB může zabránit kognitivní poruše nebo ji léčit ovlivněním ukládání beta-amyloidu. Jejich výsledky ukázaly, že MB, ať už podávaný v pitné vodě, nebo injekčně, významně zlepšil kognitivní funkce a snížil množství amyloidových depozit v mozku. Tato zjištění naznačují dvojí užitečnost MB v preventivním i terapeutickém kontextu AD.

Stelmashook et al (2023) dále hodnotili účinek MB v experimentálním modelu sporadické AD vyvolané podáním streptozotocinu [39]. Jejich výsledky ukázaly, že léčba MB zmírnila poruchy paměti, snížila zánět nervového systému a zmírnila markery autofagie u potkanů. Tyto výsledky podporují neuroprotektivní a protizánětlivé vlastnosti MB proti Alzheimerově chorobě. V další studii na zvířatech Zhou et al (2019) zkoumali účinky MB na pokles kognitivních funkcí souvisejících s kaspázou-6 u myšího modelu AD [40]. Jejich studie ukázala, že MB účinně inhiboval aktivitu kaspázy-6 v neuronech a významně zlepšil paměť a synaptické funkce. Výsledky naznačují potenciál MB zvrátit kognitivní deficity související s AD.

Methylenová modř (MB) v léčbě traumatického poškození mozku (TBI)

Methylenová modř vykazuje velký potenciál jako neuroprotektivum při traumatickém poškození mozku. Snižuje zánět, zlepšuje funkci mitochondrií, chrání hematoencefalickou bariéru a zlepšuje regeneraci. Traumatické poranění mozku (TBI) často narušuje funkci končetin, zvyšuje zánětlivé markery a poškozuje hematoencefalickou bariéru (BBB). Studie zkoumající účinek MB podávaného intravenózně (1 mg/kg) 30 minut po TBI ukázala, že významně zlepšuje limbické funkce, snižuje zánět (jak je patrné z nižších hladin proteinu S100) a obnovuje integritu BBB [41].

Laboratorní experimenty navíc potvrdily schopnost MB chránit neurony před zánětlivými toxiny, jako jsou lipopolysacharidy. Tato zjištění naznačují, že MB snižuje zánět a chrání BBB, což z něj činí slibnou léčbu TBI. Na myším modelu navíc MB podaný 15-30 minut po poranění snížil otok mozku a zánětlivé markery, včetně interleukinu-1β (IL-1β) a tumor nekrotizujícího faktoru-α (TNF-α), a zároveň zvýšil protizánětlivé markery, jako je IL-10 [42]. Z behaviorálního hlediska MB zlepšil zotavení a snížil depresivní příznaky do týdne po úrazu. Přestože MB nezabránil ztrátě hmotnosti ani motorických funkcí, jeho protizánětlivé a náladu stabilizující účinky ukazují terapeutický potenciál při léčbě TBI.

V jiné studii na modelu mírné TBI u potkanů léčených MB byly na snímcích MRI zjištěny menší objemy lézí ve srovnání s kontrolní skupinou [43]. Behaviorální testy ukázaly lepší obnovu motorických funkcí, přičemž během dvou týdnů došlo ke zlepšení funkce předních končetin a koordinace. Kromě toho histologické výsledky potvrdily méně degenerujících neuronů u zvířat léčených MB. Tyto výsledky zdůrazňují účinnost MB při snižování poškození mozku a zlepšování zotavení po mírné TBI. Studie Shena a kol. ukázala, že MB obnovuje mitochondriální membránový potenciál, zvyšuje produkci ATP a snižuje apoptózu neuronů [44]. MB posílil BBB a zlepšil kognitivní a motorické zotavení po TBI. Tato zjištění podporují MB jako potenciální léčbu mitochondriální dysfunkce a buněčné smrti způsobené poraněním mozku.

Zhao a spol. navíc ve studii na zvířatech potvrdili, že MB snižuje otok mozku a podporuje autofagii, proces, který odstraňuje poškozené buňky [45]. Snížil také aktivaci mikroglie, která může zánět zhoršovat. Neurologický deficit a objem lézí se u zvířat léčených MB významně snížil jak v akutní, tak v chronické fázi poškození, což svědčí o jeho dlouhodobém ochranném účinku. TBI navíc může vést k dlouhodobému poškození mozku a neurodegeneraci, podobně jako Alzheimerova choroba [46]. Mezi společné mechanismy patří oxidační stres, chronický zánět a mitochondriální dysfunkce. MB řeší tyto problémy zejména snížením oxidačního poškození, řízením autofagie a zlepšením funkce mitochondrií. Jeho ochranné účinky z něj činí slibnou terapii nejen TBI, ale i dalších neurodegenerativních onemocnění.

Neuropsychiatrické účinky methylenové modři (MB)

Methylenová modř (MB) má v psychiatrii dlouhou historii, poprvé byla zkoumána na počátku 20. století u poruch nálady a později byla v 70. letech 20. století znovu zvažována jako alternativa lithia u bipolární poruchy. Moderní studie potvrdily její antidepresivní a protiúzkostné účinky jak ve studiích na zvířatech, tak u pacientů s poruchami nálady, zejména s bipolární poruchou [23].

Je třeba poznamenat, že první klinické studie ukázaly, že i nízké dávky MB mohou stabilizovat náladu, aniž by vyvolaly mánii, což je častý vedlejší účinek tradičních antidepresiv. Například dvouletá studie s použitím dávky 15 mg denně významně snížila depresivní příznaky a počet hospitalizací pro bipolární poruchu [23].

Kromě stabilizace nálady má MB potenciální přínos i u dalších psychiatrických onemocnění. U schizofrenie může MB působit snížením oxidu dusnatého (NO), který je spojen s psychotickými příznaky [23]. Ačkoli studie na lidech jsou omezené, studie na zvířatech ukázaly, že MB může působit proti účinkům léků, které způsobují příznaky podobné psychóze. MB byl také testován jako kognitivní zesilovač při léčbě poruch založených na strachu, jako je klaustrofobie a posttraumatická stresová porucha (PTSD), a prokázal trvalé snížení strachu [23].

Neuroprotektivní role MB přesahuje rámec psychiatrie. Studie na potkanech vystavených malathionu, pesticidu, který způsobuje oxidační stres a poškození mozku, ukázala, že MB významně snižuje oxidační poškození a zánět mozku [23]. U potkanů léčených MB byla zjištěna nižší hladina peroxidace lipidů a oxidu dusnatého a lepší aktivita ochranných enzymů, jako jsou PON1 a AChE. Vyšší dávky MB dále minimalizovaly poškození neuronů v oblastech mozku souvisejících s pamětí, jako je mozková kůra a hipokampus [23]. Tato zjištění naznačují, že MB je neuroprotektivní a terapeutický prostředek u mnoha psychiatrických a neurologických stavů. Tím, že MB snižuje oxidační stres, zánět a příznaky spojené s psychózou, nabízí výhody pro duševní zdraví a kognitivní funkce.

Jak methylenová modř (MB) podporuje zdraví mozku?

Methylenová modř (MB) hraje mnoho rolí při podpoře zdraví mozku. Působí na různé dráhy, které pomáhají léčit poruchy mozku a nálady [47-49]. Patří mezi ně např;

• Dodávka energie pro mozkové buňky: MB působí jako redoxní činidlo, které přepíná mezi oxidovanou a redukovanou formou, aby obešlo blokády v mitochondriálním elektronovém transportním řetězci, zejména v komplexu I a komplexu III. Obnovením toku elektronů zvyšuje MB produkci ATP, hlavního zdroje energie pro mozkové buňky. To je zvláště prospěšné v podmínkách s nízkou hladinou kyslíku (hypoxie), jako je mrtvice nebo neurodegenerativní onemocnění, kdy mají mozkové buňky potíže s produkcí dostatečného množství energie.
• Zaměření na mozkové buňky: MB má jedinečnou schopnost procházet hematoencefalickou bariérou a hromadit se v mozkových tkáních. Toto selektivní zacílení zajišťuje, že se jeho účinek koncentruje v nervovém systému. Díky této vlastnosti je MB účinný při léčbě stavů spojených zejména s dysfunkcí mozkových buněk, jako je Alzheimerova choroba a poranění mozku.
• Zlepšuje náladu: MB inhibuje monoaminooxidázu (MAO), enzym, který rozkládá neurotransmitery, jako je serotonin, noradrenalin a dopamin. Tím, že MB zabraňuje odbourávání těchto chemických látek regulujících náladu, zvyšuje jejich hladinu, čímž pomáhá stabilizovat náladu a snižovat příznaky deprese a úzkosti.
• Chrání před oxidačním stresem: MB snižuje produkci reaktivních forem kyslíku (ROS) tím, že působí jako mitochondriální přenašeč elektronů. ROS jsou škodlivé molekuly, které způsobují oxidační poškození buněk. MB také snižuje hladinu oxidu dusnatého (NO), který ve velkém množství přispívá k oxidačnímu stresu a zánětu. Regulací hladiny NO chrání MB neurony před poškozením a udržuje zdravou funkci mozku.
• Reguluje signály mozkových buněk: MB inhibuje guanylylcyklázu, enzym, který se podílí na tvorbě cyklického GMP (cGMP), signální molekuly v mozkových buňkách. Nadměrně aktivní signalizace cGMP může vést ke škodlivé nadměrné aktivitě neuronů. MB pomáhá tuto aktivitu modulovat, zabraňuje poškození a podporuje normální komunikaci v mozku.
• Zabraňuje tvorbě shluků proteinu Tau: U Alzheimerovy choroby se tau proteiny skládají a shlukují, čímž narušují buněčnou funkci. MB přímo inhibuje agregaci tau a zpomaluje progresi neurodegenerace. Tento mechanismus pomáhá chránit mozkové buňky před strukturálním a funkčním poškozením spojeným s Alzheimerovou chorobou.
• Podporuje neurotransmitery: MB zvyšuje uvolňování neurotransmiterů, jako je serotonin, noradrenalin a dopamin, které jsou nezbytné pro regulaci nálady, soustředění a celkové kognitivní funkce. Udržováním těchto chemických látek podporuje MB emoční pohodu a duševní jasnost.
• Snižuje hladinu beta amyloidu: Amyloid beta je toxický protein, který se hromadí u Alzheimerovy choroby a vede k poškození neuronů a ztrátě paměti. MB snižuje produkci amyloidu beta a zabraňuje jeho interakci s mitochondriálními enzymy, jako je alkoholdehydrogenáza vázající amyloid (ABAD). Tím se zachovává mitochondriální funkce a předchází se buněčné smrti.
• Zlepšuje paměť a učení: MB zvyšuje aktivitu acetylcholinu, neurotransmiteru nezbytného pro učení a paměť. Toto posílení podporuje poznávání a může pomoci zmírnit poruchy paměti u stavů, jako je Alzheimerova choroba a traumatické poškození mozku.

Díky těmto kombinovaným účinkům je MB potenciálním lékem na řadu mozkových onemocnění, včetně poruch nálady, problémů s pamětí a dokonce i neurodegenerativních onemocnění, jako je Alzheimerova choroba. Protože byl MB jedním z prvních léků používaných k léčbě mozku, má dlouhou historii, ale nový výzkum pro něj nachází ještě další využití.

Methylenová modř v ischemické reperfuzi

Studie prokázaly, že methylenová modř pomáhá a zmírňuje příznaky nebo komplikace spojené s ischemií. Ve studii Lu et al (2016) prokázali, že methylenová modř snižuje odumírání hipokampálních buněk a zlepšuje paměťový deficit po globální mozkové ischemii (GCI) u potkanů [50]. MB podávaná v dávce 0,5 mg/kg/den subkutánní minipumpou po dobu sedmi dnů významně zvýšila přežívání neuronů v oblasti CA1 hipokampu a zachovala mitochondriální funkce, včetně aktivity cytochrom c oxidázy a produkce ATP. Bylo rovněž zaznamenáno zlepšení chování v testech prostorového učení a paměti, což svědčí o schopnosti MB snižovat buněčnou smrt a podporovat kognitivní zotavení po ischemii.

Shi et al (2021) navíc zkoumali, jak MB snižuje edém mozku způsobený ischemickou cévní mozkovou příhodou [51]. Intravenózně podávaný MB snižoval cytotoxický i vazogenní edém u potkanů, což bylo prokázáno pomocí snímků MRI. Mechanisticky MB inhiboval expresi akvaporinu 4 (AQP4) a snížil aktivaci dráhy ERK1/2 v astrocytech, které jsou nezbytné pro rovnováhu vody v mozku. Tato zjištění, potvrzená na modelech buněčných kultur, naznačují, že MB snižuje edém mozku modulací AQP4 a ERK1/2 a pomáhá léčit edém mozku po cévní mozkové příhodě.

V jiné studii Huang et al (2018) hodnotili účinky chronické perorální léčby MB (v nízké dávce) na modelu fokální ischemie u potkanů. Výsledky ukázaly významné behaviorální a strukturální zlepšení, včetně snížení objemu lézí a poškození bílé hmoty [52].

Také Miclescu et al (2010) zkoumali úlohu MB při ochraně hematoencefalické bariéry (BBB) během ischemií/reperfuzí indukované srdeční zástavy na prasečím modelu [53]. Infuze MB během resuscitace snížila únik albuminu, obsah vody v mozku a poškození neuronů. Snížila také poškození vyvolané oxidem dusnatým a zvýšila aktivaci endoteliální syntázy oxidu dusnatého. Tyto výsledky naznačují potenciál MB zachovat integritu BBB a zabránit poškození mozku při scénáři ischemie/reperfuze.

Zhang et al (2020) navíc prokázali neuroprotektivní potenciál MB na modelu hypoxicko-ischemického poškození mozku u novorozenců [54]. MB zachoval mitochondriální funkce, snížil oxidační stres a neurozánět a zlepšil integritu hematoencefalické bariéry. Kromě toho behaviorální testy potvrdily zlepšení motorické koordinace a paměti u léčených potkanů. Tato zjištění naznačují, že MB je slibnou terapií neonatální encefalopatie HI.

Ryou et al (2015) během laboratorních studií odhalili roli MB při zvyšování energetického metabolismu a aktivaci hypoxií indukovaného faktoru-1α (HIF-1α) během kyslíko-glukózové deprivace (OGD) a reoxygenace v neuronálních buňkách [55]. MB zlepšil příjem glukózy, produkci ATP a aktivitu mitochondriálních enzymů. Zvýšil také jadernou translokaci hypoxií indukovaného faktoru-1α (HIF-1α).

Dávkování, farmakokinetika a kontraindikace methylenové modři

Methylenová modř (MB) se často užívá perorálně v dávkách 15 až 300 mg denně, přičemž maximální koncentrace v krvi se obvykle dosahuje 1 až 2 hodiny po požití [34]. Intravenózní (IV) MB se vstřebává účinněji, takže je potenciálně lepší pro účinky související s mozkem, ačkoli nejlepší dávka pro psychiatrické použití je stále nejistá. Zajímavé je, že vyšší perorální dávky nevedou vždy k předvídatelně vyšším hladinám v krvi.

Tělo odstraňuje MB hlavně ledvinami, často jako leukomethylenovou modř spolu se dvěma příbuznými sloučeninami, azurovou A a azurovou B. Lazurit B dokonce ve studiích na zvířatech prokázal účinky zlepšující náladu. Poločas rozpadu MB je přibližně 5 až 6,5 hodiny [34].

Účinky MB se liší v závislosti na dávce. Nízké dávky často zlepšují náladu a mají uklidňující účinek, zatímco vyšší dávky mohou mít opačný efekt a ve studiích na zvířatech potenciálně zvyšují oxidační stres [34].

MB je u lidí obvykle dobře snášen, ale mohou se vyskytnout mírné nežádoucí účinky, jako jsou žaludeční potíže, problémy s močením nebo namodralé zabarvení moči, které je pro některé lidi nepříjemné [34].

Při používání MB existují důležitá bezpečnostní hlediska. FDA varuje, že kombinace MB, zejména v intravenózní formě, s některými antidepresivy, která ovlivňují serotonin, může způsobit serotoninový syndrom, což je závažná reakce. Při perorálním užívání MB však žádné takové případy hlášeny nebyly [34].

Kromě toho by se měli MB vyhýbat lidé s nedostatkem enzymu glukózo-6-fosfátdehydrogenázy (G6PD), protože může způsobit hemolytickou anémii, což je stav, kdy dochází k předčasnému rozpadu červených krvinek. Tento nedostatek je častější u středomořské, africké a asijské populace [34].

Odmítnutí odpovědnosti

Tento článek je napsán za účelem osvěty a zvýšení povědomí o diskutované látce. Je důležité si uvědomit, že diskutovaná látka je látka, nikoli konkrétní výrobek. Informace obsažené v textu vycházejí z dostupných vědeckých studií a nejsou určeny jako lékařské doporučení nebo propagace samoléčby. Čtenáři se doporučuje, aby veškerá rozhodnutí týkající se zdraví a léčby konzultoval s kvalifikovaným zdravotnickým pracovníkem.

Odkazy

1. Tucker, D., Lu, Y. a Zhang, Q., 2018. Od mitochondriální funkce k neuroprotekci - nová role methylenové modři. Molekulární neurobiologie, 55, s. 5137-5153. https://link.
2. Bužga M, Machytka E, Dvořáčková E, Švagera Z, Stejskal D, Máca J, Král J. Methylenová modř: kontroverzní diagnostická kyselina a lék? Toxicol Res (Camb). 2022 Aug 30;11(5):711-717. doi: 10.1093/toxres/tfac050. PMID: 36337249; PMCID: PMC9618115. https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9618115/
3. Khan, I., Saeed, K., Zekker, I., Zhang, B., Hendi, A.H., Ahmad, A., Ahmad, S., Zada, N., Ahmad, H., Shah, L.A. a Shah, T., 2022, A review of methylene blue: Její vlastnosti, aplikace, toxicita a fotodegradace. Voda, 14(2), s. 242. https://www.mdpi.com/2073-4441/14/2/242
4. Rodriguez, P., Zhou, W., Barrett, D.W., Altmeyer, W., Gutierrez, J.E., Li, J., Lancaster, J.L., Gonzalez-Lima, F., and Duong, T.Q., 2016. Multimodální randomizované funkční MR zobrazování účinků metylenové modři v lidském mozku. Radiologie, 281(2), s. 516-526. .
5. Rodriguez, P., Singh, A.P., Malloy, K.E.. a další. Methylenová modř moduluje funkční konektivitu v lidském mozku. Zobrazování mozku a chování 11, 640-648 (2017). https://doi.org/10.1007/s11682-016-9541-6
6. Telch MJ, Bruchey AK, Rosenfield D a kol. Účinky podání metylenové modři po sezení na vymizení strachu a kontextovou paměť u dospělých s klaustrofobií. Am J Psychiatry. 2014;171(10):1091-1098. doi:10.1176/appi.ajp.2014.13101407
7. Alda M, McKinnon M, Blagdon R a kol. Léčba reziduálních příznaků bipolární poruchy metylenovou modří: randomizovaná zkřížená studie. Br J Psychiatry. 2017;210(1):54-60. doi:10.1192/bjp.bp.115.173930
8. Domínguez-Rojas JA, Caqui P, Sanchez A, Coronado Munoz AJ. Methylenová modř v léčbě refrakterního septického šoku sekundárního k listerióze u dětského pacienta. BMJ Case Rep. 2022; 15 (2): e243772. Publikováno 2022 Feb 28. doi:10.1136/bcr-2021-243772
9. Gharaibeh EZ, Telfah M, Powers BC, Salacz ME. Hydratace, methylenová modř a thiamin jako prevence encefalopatie vyvolané ifosfamidem. J Oncol Pharm Pract. 2019;25(7):1784-1786. doi:10.1177/1078155218808361
10. Gureev AP, Syromyatnikov MY, Gorbacheva TM, Starkov AA, Popov VN. Methylenová modř zlepšuje senzomotorický fenotyp a snižuje úzkost souběžně s aktivací biogeneze mozkových mitochondrií u myší středního věku. Neurosci Res. 2016;113:19-27. doi:10.1016/j.neures.2016.07.006
11. Riha PD, Bruchey AK, Echevarria DJ, Gonzalez-Lima F. Facilitace paměti methylenovou modří: účinky na chování a spotřebu kyslíku v mozku v závislosti na dávce. Eur J Pharmacol. 2005;511(2-3):151-158. doi:10.1016/j.ejphar.2005.02.001
12. Callaway NL, Riha PD, Bruchey AK, Munshi Z, Gonzalez-Lima F. Methylenová modř zlepšuje oxidativní metabolismus mozku a retenci paměti u potkanů. Pharmacol Biochem Behavior. 2004;77(1):175-181. doi:10.1016/j.pbb.2003.10.007
13. Lin, A.L., Poteet, E., Du, F., Gourav, R.C., Liu, R., Wen, Y., Bresnen, A., Huang, S., Fox, P.T., Yang, S.H. a Duong, T.Q., 2012. methylenová modř jako cerebrální metabolický a hemodynamický zesilovač.). https://journals.
14. Tucker, Donovan; Lu, Yujiao; Zhang, Quanguang . (2017). Od mitochondriální funkce k neuroprotekci - nová role methylenové modři. Molecular Neurobiology, (), -. doi:10.1007/s12035-017-0712-2 https://pismin.com/10.1007/s12035-017-0712-
15. Wrubel, K.M., Riha, P.D., Maldonado, M.A., McCollum, D. a Gonzalez-Lima, F., 2007. Metabolický zesilovač mozku methylenová modř zlepšuje diskriminační učení u potkanů. Farmakologie Biochemie a chování, 86(4), s. 712-717. https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0091305707000895 ■.
16. Haouzi, P., Sonobe, T. a Judenherc-Haouzi, A., 2020. poškození mozku způsobené otravou sirovodíkem a methylenovou modří. Neurobiologie onemocnění, 133, s. 104474. https://www.
17. Zhang, X., C. Rojas, J., a Gonzalez-Lima, F., 2006. methylenová modř zabraňuje neurodegeneraci sítnice vyvolané rotenonem. Výzkum neurotoxicity, 9, s. 47-57. https://link.
18. Singh, N., MacNicol, E., DiPasquale, O., Randall, K., Lythgoe, D., Mazibuko, N., Simmons, C., Selvaggi, P., Stephenson, S., Turkheimer, F.E. a Cash, D., 2023. Účinky akutního podání methylenové modři na průtok krve mozkem a metabolismus u lidí a potkanů. Časopis Cerebral Blood Flow & Metabolism, 43(2_suppl), s.95-105. .
19. Rojas, J.C., Simola, N., Kermath, B.A., Kane, J.R., Schallert, T. a Gonzalez-Lima, F., 2009. neuroprotekce striata methylenovou modří. Neurovědy, 163(3), s. 877-889. .
20. Gonzalez-Lima, F. a Bruchey, A.K., 2004. Zlepšení extinkční paměti metabolickým zesilovačem methylenovou modří. Učení a paměť, 11(5), s. 633-640. https://learnmem.
21. Bhurtel, S., Katila, N., Neupane, S., Srivastav, S., Park, P.H. a Choi, D.Y., 2018. methylenová modř chrání dopaminergní neurony před neurotoxicitou vyvolanou MPTP regulací neurotrofického faktoru odvozeného od mozku. Annals of the New York Academy of Sciences, 1431(1), s. 58-71. https://nyaspubs.
22. Abdel-Salam, O.M., Omara, E.A., Youness, E.R., Khadrawy, Y.A., Mohammed, N.A. a Sleem, A.A., 2014. rotenonem indukovaná nigrostriatální toxicita je snížena methylenovou modří. Journal of Neurorestoratology, 2, s. 65-80. https://core.
23. Abdel-Salam, O.M., Youness, E.R., Esmail, R.S.E., Mohammed, N.A., Khadrawy, Y.A., Sleem, A.A. a Abdulaziz, A.M., 2016. methylenová modř jako nové neuroprotektivum při akutní otravě malathionem. Reaktivní formy kyslíku, 1(2), s. 165-177. Odkaz na studii
24. Abdel-Salam, O.M., Youness, E.R., Morsy, F.A., Yassen, N.N., Mohammed, N.A. a Sleem, A.A., 2016. Methylenová modř chrání před poškozením mozku vyvolaným toluenem: zapojení oxidu dusnatého, NF-κB a kaspázy-3. Reaktivní formy kyslíku, 2(5), s. 371-87. Odkaz na studii
25. Wu C, Deng Q, Zhu L, Liu TC, Duan R, Yang L. Předléčení methylenovou modří chrání před opakovaným poškozením mozku novorozenců a ztrátou paměti vyvolanou expozicí izofluranu. Mol Neurobiol. 2024;61(8):5787-5801. doi:10.1007/s12035-024-03931-0
26. Goma AA, El Okle OS, Tohamy HG. Protective effect of methylene blue on neurobehavioral toxicity induced by copper oxide nanoparticles. Behavior Brain Res. 2021;398:112942. doi:10.1016/j.bbr.2020.112942
27. Delport, Anzelle; Harvey, Brian H.; Petzer, Anél; Petzer, Jacobus P. . (2017). Methylenová modř a její analogy jako antidepresiva. Metabolic Brain Disease, (), -. doi:10.1007/s11011-017-0081-6  https://link.springer.com/article/10.1007/s11011-017-0081-6
28. Yang, L., Youngblood, H., Wu, C. a Zhang, Q., 2020. Mitochondrie jako cíl neuroprotekce: role methylenové modři a fotobiomodulace. Translační neurodegenerace, 9, s. 1-22. https://link.
29. Liu Y, Tan Y, Cheng G a kol. Personalizovaný intranazální hydrogel podávající methylenovou modř zlepšuje kognitivní poruchy u Alzheimerovy choroby. Adv Mater. 2024;36(19):e2307081. doi:10.1002/adma.202307081 https://pubmed.
30. Zakaria, A., Hamdi, N., a Abdel-Kader, R.M., 2016. methylenová modř zlepšuje mitochondriální funkci mozku ABAD a snižuje Aβ u myšího modelu neuroinflamatorní Alzheimerovy choroby. Molekulární neurobiologie, 53, s. 1220-1228. https://link.
31. Wilcock GK, Gauthier S, Frisoni GB, et al. Potenciál monoterapie nízkými dávkami leuko-methylthioninium bis(hydromethanesulfonátu) (LMTM) pro léčbu mírné formy Alzheimerovy choroby: kohortová analýza jako modifikovaný primární výsledek klinického hodnocení fáze III. J Alzheimers Dis. 2018;61(1):435-457. doi:10.3233/JAD-170560
32. Wischik CM, Staff RT, Wischik DJ a další Terapie inhibitory agregace tau: studie fáze 2 u mírné až středně těžké Alzheimerovy choroby. J Alzheimers Dis. 2015;44(2):705-720. doi:10.3233/JAD-142874
33. Baddeley TC, McCaffrey J, Storey JM, et al. Komplexní dispozice methylthioninových redoxních forem určuje účinnost léčby inhibitory agregace tau u Alzheimerovy choroby. J Pharmacol Exp Ther. 2015;352(1):110-118. doi:10.1124/jpet.114.219352
34. Alda, Martin. (2019). Methylenová modř v léčbě neuropsychiatrických poruch. CNS Drugs, (), -. doi:10.1007/s40263-019-00641-3  https://pismin.com/10.1007/s40263-019-00641-
35. Atamna, H. a Kumar, R., 2010. Ochranná role methylenové modři u Alzheimerovy choroby prostřednictvím mitochondrií a cytochrom c oxidázy. Journal of Alzheimer's Disease, 20(s2), s.S439-S452. .
36. Medina, D.X., Caccamo, A. a Oddo, S., 2011. methylenová modř snižuje hladiny Aβ a zachraňuje časné kognitivní deficity zvýšením aktivity proteazomu. Patologie mozku, 21(2), s. 140-149. .
37. Auchter, A., Williams, J., Barksdale, B., Monfils, M.H. a Gonzalez-Lima, F., 2014. terapeutický přínos methylenové modři na kognitivní poruchy během chronické mozkové hypoperfuze. Journal of Alzheimer's Disease, 42(s4), s.S525-S535. .
38. Paban, V., Manrique, C., Filali, M., Maunoir-Regimbal, S., Fauvelle, F. a Alescio-Lautier, B., 2014. Terapeutické a preventivní účinky methylenové modři na patologii Alzheimerovy choroby na transgenním myším modelu. Neurofarmakologie, 76, s. 68-79. https://www.
39. Stelmashook EV, Voronkov DN, Stavrovskaya AV, et al. Neuroprotektivní účinky methylenové modři v modelu Alzheimerovy choroby vyvolané streptozotocinem. Brain Res. 2023;1805:148290. doi:10.1016/j.brainres.2023.148290
40. Zhou L, Flores J, Noël A, Beauchet O, Sjöström PJ, LeBlanc AC. Methylenová modř inhibuje aktivitu kaspázy-6 a zvrátí kaspázou-6 indukované kognitivní poškození a neurozánět u stárnoucích myší. Acta Neuropathol Commun. 2019;7(1):210. publikováno 2019 Dec 16. doi:10.1186/s40478-019-0856-6
41. Genrikhs EE, Stelmashook EV, Voronkov DN, et al. Jednorázové intravenózní podání methylenové modři po traumatickém poranění mozku snižuje neurologický deficit, narušení hematoencefalické bariéry a sníženou expresi proteinu S100 u potkanů. Brain Res. 2020;1740:146854. doi:10.1016/j.brainres.2020.146854 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32339501/
42. Fenn AM, Skendelas JP, Moussa DN, et al. Methylenová modř tlumí neurozánět spojený s traumatickým poškozením mozku a akutním chováním podobným depresi u myší. J Neurotrauma. 2015;32(2):127-138. doi:10.1089/neu.2014.3514
43. Talley Watts L, Long JA, Chemello J a další Methylenová modř má neuroprotektivní účinky proti mírnému traumatickému poškození mozku. J Neurotrauma. 2014;31(11):1063-1071. doi:10.1089/neu.2013.3193 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24479842/
44. Shen, J., Xin, W., Li, Q., Gao, Y., Yuan, L. a Zhang, J., 2019. methylenová modř snižuje neuronální apoptózu a zlepšuje integritu hematoencefalické bariéry po traumatickém poranění mozku. Frontiers in Neurology, 10, s. 1133. https://www.
45. Zhao, M., Liang, F., Xu, H., Yan, W. a Zhang, J., 2016. Methylenová modř působí neuroprotektivně proti traumatickému poškození mozku podporou autofagie a inhibicí aktivace mikroglie. Zprávy z molekulární medicíny, 13(1), s. 13-20. https://www.
46. Isaev, N.K., Genrikhs, E.E., and Stelmashook, E.V., 2024. Methylenová modř a její potenciál v léčbě traumatického poškození mozku, mozkové ischemie a Alzheimerovy choroby. Recenze v oblasti neurověd, (0). https://www.
47. Howland, R.H., 2016. methylenová modř: Dlouhá a klikatá cesta od skvrny k mozku: Část 2. Časopis psychosociálního ošetřovatelství a služeb duševního zdraví, 54(10), s. 21-26. https://journals.healio.com/doi/abs/10.3928/02793695-20160920-04
48. Gureev, A.P., Sadovnikova, I.S. a Popov, V.N., 2022. Molekulární mechanismy neuroprotektivního účinku methylenové modři. Biochemie (Moskva), 87(9), s. 940-956. https://link.
49. Rojas, J.C., Bruchey, A.K. a Gonzalez-Lima, F., 2012. Neurometabolické mechanismy posílení paměti a neuroprotekce methylenovou modří. Pokrok v neurobiologii, 96(1), s. 32-45. .
50. Lu, Q., Tucker, D., Dong, Y., Zhao, N. a Zhang, Q., 2016. Neuroprotektivní a funkční účinky metylenové modři u globální mozkové ischemie. Molekulární neurobiologie, 53, s. 5344-5355. https://link.
51. Shi, Z.F., Fang, Q., Chen, Y., Xu, L.X., Wu, M., Jia, M., Lu, Y., Wang, X.X., Wang, Y.J., Yan, X. a Dong, L.P., 2021. Methylenová modř zmírňuje otok mozku u potkanů s experimentální ischemickou cévní mozkovou příhodou inhibicí exprese aquaporinu 4. Acta Pharmacologica Sinica, 42(3), s. 382-392. https://www.
52. Huang L, Lu J, Cerqueira B, Liu Y, Jiang Z, Duong TQ. Chronická perorální léčba methylenovou modří na modelu fokální mozkové ischemie/reperfuze u potkanů. Brain Res. 2018;1678:322-329. doi:10.1016/j.brainres.2017.10.033
53. Miclescu A, Sharma HS, Martijn C, Wiklund L. Methylenová modř chrání kortikální hematoencefalickou bariéru před poruchami vyvolanými ischémií/reperfuzí. Crit Care Med. 2010;38(11):2199-2206. doi:10.1097/CCM.0b013e3181f26b0c https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20711066/
54. Zhang G, Lu Y, Yang L a kol. Methylenová modř po léčbě zlepšuje zotavení z hypoxie a ischemie na modelu novorozených potkanů. Neurochem Int. 2020; 139: 104782. doi: 10.1016/j.neuint.2020.104782 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32628986/
55. Ryou MG, Choudhury GR, Li W, et al. Methylenovou modří indukovaný ochranný mechanismus neuronů proti hypoxicko-reoxygenačnímu stresu. Neurovědy. 2015;301:193-203. doi:10.1016/j.neuroscience.2015.05.064