GHK-CU - Vzdelávací materiál

GHK-Cu alebo glycyl-L-histidyl-L-lyzín meď je prirodzene sa vyskytujúci tripeptid prvýkrát izolovaný v roku 1973 z ľudskej plazmy. Tento peptid, zložený z aminokyselín glycínu, histidínu a lyzínu, má silnú afinitu k iónom medi a vytvára komplex známy ako GHK-Cu. Pôvodne bol objavený pre svoju schopnosť prinútiť staré ľudské pečeňové tkanivo syntetizovať proteíny ako mladé tkanivo, prítomnosť GHK v ľudských telesných tekutinách, ako je plazma, sliny a moč, naznačuje jeho účasť na prirodzenom hojení a udržiavaní tkanív.

Výskum v priebehu rokov ukázal, že peptid GHK-Cu zohráva významnú úlohu pri hojení rán, starostlivosti o pleť, kozmetike a liečbe proti starnutiu. Je známe, že urýchľuje regeneračné procesy, zvyšuje antioxidačné a protizápalové reakcie a zlepšuje biologickú dostupnosť medi, ktorá je dôležitá pre rôzne metabolické funkcie. Schopnosť GHK viazať meď nielenže pomáha regulovať metabolizmus medi, ale zároveň z nej robí základnú zložku bunkovej aktivity, ktorá uľahčuje hojenie a obnovu tkanív.

Od svojho objavu sa peptid GHK-Cu široko používa v kozmetických a lekárskych výrobkoch na starostlivosť o pleť a vlasy. Jeho účinnosť sa pripisuje nielen jeho vlastnostiam viazať meď, ale aj jeho účinku na expresiu génov. Peptid GHK-Cu sa skúma aj z hľadiska jeho potenciálneho terapeutického využitia pri stavoch súvisiacich s vekom, ako je neurodegenerácia a pokles kognitívnych funkcií.

GHK-Cu peptid na obnovu tkanív a hojenie rán

Komplex GHK-Cu zohráva významnú úlohu pri remodelácii tkanív, obnove kože a hojení rán tým, že podporuje rôzne biologické procesy potrebné na zotavenie po poranení. V komplexnej analýze Pickarta (2008) peptid zvýšil nábor kľúčových regeneračných buniek, ako sú makrofágy a kapilárne bunky, do miesta rany [1]. Podporoval zápalovú reakciu, pomáhal odstraňovať škodlivé faktory, ako sú voľné radikály, a podporoval proces obnovy tým, že moduloval syntézu kolagénu, elastínu a ďalších dôležitých proteínov potrebných na obnovu štruktúry tkaniva. Okrem toho GHK-Cu stimuloval produkciu rastových faktorov, ako je vaskulárny endotelový rastový faktor a nervový rastový faktor, čo prispelo k zlepšeniu angiogenézy, rastu nervov a elasticity kože [1].

GHK-Cu má významné protizápalové vlastnosti; znižuje oxidačné faktory a zvyšuje produkciu antioxidantov, ako je superoxiddismutáza. Okrem toho zlepšuje prietok krvi do poškodených oblastí rozšírením ciev. Na bunkovej úrovni GHK-Cu stimuluje produkciu rastových faktorov - napríklad vaskulárneho endotelového rastového faktora a fibroblastového rastového faktora - ktoré sú dôležité pre zvýšenie proliferácie buniek, regeneráciu nervov, angiogenézu a zlepšenie zdravia a veľkosti vlasových folikulov [1]. V laboratórnych podmienkach sa preukázalo, že liečba GHK-Cu výrazne zvyšuje proliferáciu keratinocytov - kľúčových bariérových buniek kože [2]. Techniky ako farbenie hematoxylínom a eozínom, imunohistochémia a western blot analýza potvrdili zvýšenie markerov súvisiacich s proliferáciou a prežívaním buniek. Okrem toho sa pod vplyvom GHK-Cu zvýšili hladiny proliferačného bunkového jadrového antigénu (PCNA) a markerov kmeňových buniek, ako je p63, čo naznačuje zvýšenú regeneračnú schopnosť. Zvýšila sa aj expresia integrínov, ktoré sú kľúčové pre adhéziu a signalizáciu buniek, čo ďalej podporuje úlohu peptidu v integrite a obnove kože [2].

Ďalšia štúdia sa zamerala na terapeutické účinky GHK-Cu zapuzdreného v lipozómoch, najmä na jeho vplyv na rast endotelových buniek a hojenie popálenín u myší [3]. Zapuzdrenie do lipozómov v nanorozmeroch viedlo k významnému 33,1% zvýšeniu rýchlosti rastu endotelových buniek ľudskej pupočníkovej žily (HUVEC). Ide o bunky, ktoré vystielajú cievy a sú dôležité pre tvorbu nových ciev počas procesu hojenia. Prietoková cytometria tiež ukázala zmeny v bunkovom cykle, pričom viac buniek bolo vo fáze G1 a menej vo fáze G2, čo naznačuje zrýchlený priebeh bunkového cyklu. Okrem toho Western blotting odhalil, že liečba lipozómami GHK-Cu zvýšila hladiny proteínov dôležitých pre rast ciev a tkanív, ako sú vaskulárny endotelový rastový faktor a fibroblastový rastový faktor 2, spolu s proteínmi bunkového cyklu CDK4 a cyklín D1. Štúdia ukázala, že peptidy zapuzdrené v lipozómoch pomáhali bunkám efektívnejšie prechádzať rastovým cyklom [3]. V inej štúdii na modeli popáleninovej rany na myši lipozómy GHK-Cu významne podporili angiogenézu v porovnaní s voľným GHK-Cu, pričom sa významne zvýšila expresia CD31 a Ki67, markerov cievnej a bunkovej proliferácie [4]. Zvýšená angiogenéza prispela k rýchlejšiemu hojeniu, čím sa skrátil čas zotavenia len na 14 dní po poranení. Tieto výsledky poukazujú na lipozómy GHK-Cu ako na cennú možnosť zlepšenia hojenia kožných rán. Ponúkajú rýchlejší čas zotavenia a podporujú prirodzené procesy obnovy organizmu, čo z nich robí sľubnú možnosť pre lekárske a potenciálne aj kozmetické aplikácie, kde je žiaduca rýchla obnova kože.

Okrem toho počas hĺbkovej štúdie terapeutických účinkov glycyl-histidyl-lyzínu-Cu (2+) výskumník zistil súvislosť medzi aplikáciou GHK-Cu a syntézou glykozaminoglykánu [5]. Pomocou experimentálnych modelov rán potkanov a kultúr kožných fibroblastov potkanov výskumníci podávali opakované injekcie GHK-Cu v dávke 2 mg na injekciu. Výsledky boli významné: GHK-Cu jednoznačne stimuloval produkciu tkaniva rany, čo sa prejavilo zvýšením suchej hmotnosti aj celkovej hladiny bielkovín. Zvýšil aj produkciu kolagénu typu I a glykozaminoglykánov, pričom sa výrazne zvýšil obsah hydroxyprolínu a kyseliny urónovej. Elektroforetická analýza tiež ukázala výraznú akumuláciu chondroitín sulfátu a dermatan sulfátu v oblastiach rán, zatiaľ čo hladiny kyseliny hyalurónovej sa časom znížili [5]. Tieto výsledky poukazujú na schopnosť GHK-Cu selektívne modulovať kľúčové zložky extracelulárnej matrix, čím sa zlepšuje reparácia tkaniva a procesy hojenia rán. Okrem toho prehľad štúdií ukázal, že GHK-Cu pomáha omladzovať fibroblasty po ich vystavení žiareniu a priťahuje imunitné a endotelové bunky do poškodených oblastí. Ako taký môže pomáhať pri obnove rôznych tkanív, napríklad kože, vlasových folikulov a gastrointestinálneho traktu [6]. V kozmetickom priemysle sa GHK-Cu považuje za nový prístup k vypnutiu ochabnutej pokožky, zvýšeniu pružnosti a pevnosti a zlepšeniu celkového vzhľadu pokožky redukciou jemných liniek, vrások, poškodenia slnkom a tmavých škvŕn. Podporuje tiež rast keratinocytov, ktoré sú nevyhnutné pre zdravú pokožku [6].

GHK-Cu peptid pre zdravie pľúc

Početné štúdie preukázali, že peptid GHK-Cu zlepšuje a podporuje optimálnu funkciu pľúc a chráni dýchací systém pred rôznymi ochoreniami. V štúdii na myšiach s idiopatickou pľúcnou fibrózou (IPF), závažným ochorením pľúc charakterizovaným progresívnym zjazvením, glycyl-L-histidyl-l-lyzín v kombinácii s meďou (GHK-Cu) preukázal významné výsledky. Výskumníci hodnotili potenciál GHK-Cu pri liečbe IPF a pľúcnej fibrózy na myšom modeli [7]. V tomto modeli sa GHK-Cu podával myšiam v rôznych dávkach, pričom vykazoval sľubné terapeutické účinky tým, že zvyšoval regeneráciu pľúcneho tkaniva. Konkrétne liečba viedla k zníženiu zápalových cytokínov, zníženiu aktivity škodlivých enzýmov v pľúcach a menšiemu ukladaniu kolagénu, čo je charakteristickým znakom fibrózy. Zistilo sa tiež, že GHK-Cu obnovuje rovnováhu medzi molekulami, ktoré rozkladajú a brzdia nadmerný rast tkaniva, a pomáha zmierniť proces, pri ktorom sa epitelové bunky dostávajú do stavu, ktorý prispieva k fibróze. Modulácia niekoľkých kľúčových signálnych dráh zapojených do zápalu a fibrózy zdôrazňuje

potenciál GHK-Cu ako novej možnosti liečby IPF. Ďalšia štúdia simulovala IPF u myší pomocou intratracheálnych injekcií bleomycínu, po ktorých nasledovala striedavá liečba GHK [8]. Účinnosť GHK sa hodnotila skúmaním reakcií pľúcneho tkaniva vrátane zápalu a ukladania kolagénu, ktoré sú dôležité pri rozvoji fibrózy. Výsledky ukázali, že GHK významne znížil známky zápalu a fibrózy v pľúcach. Znížil hrúbku intersticiálnej oblasti pľúc, znížil ukladanie kolagénu a znížil hladiny kľúčových markerov zápalu a fibrózy [8]. Tieto zistenia naznačujú, že GHK má potenciál zvrátiť alebo zablokovať progresiu IPF ovplyvnením kľúčových biochemických dráh zapojených do procesu ochorenia.

Okrem toho peptid GHK-Cu preukázal priaznivé účinky pri liečbe akútneho poškodenia pľúc (ALI) a syndrómu akútnej respiračnej tiesne (ARDS). V laboratórnych experimentoch liečba GHK-Cu významne znížila reaktívne formy kyslíka (ROS) a zvýšila aktivitu superoxiddismutázy (SOD) v bunkách vystavených lipopolysacharidu (LPS), čo je bežná experimentálna metóda na vyvolanie zápalu. Okrem toho GHK-Cu znížil množstvo kľúčových zápalových cytokínov v týchto bunkách, čo je dôležité pre zvládnutie zápalovej reakcie [9]. Na myšom modeli liečba GHK-Cu znížila poškodenie pľúcneho tkaniva a zápal, čo naznačuje, že pomáha zachovať štruktúru a funkciu pľúc počas ALI. Tieto zistenia naznačujú, že GHK-Cu môže byť novým prístupom k liečbe ALI a ARDS [9]. Okrem toho GHK-Cu vďaka svojim regeneračným, antioxidačným a protizápalovým vlastnostiam preukázal potenciálne výsledky pri liečbe chronickej obštrukčnej choroby pľúc (CHOCHP) [10]. CHOCHP je charakterizovaná pretrvávajúcim obmedzením prietoku vzduchu a chronickým zápalom, ktorý často zhoršujú faktory prostredia, ako je cigaretový dym. Vedci skúmali účinok GHK-Cu na emfyzém vyvolaný expozíciou cigaretovému dymu u myší. Počas 12 týždňov sa myšiam vystaveným cigaretovému dymu podával GHK-Cu, ktorý znížil poškodenie pľúc a nerovnováhu medzi deštruktívnymi enzýmami a ich inhibítormi v pľúcach. Znížil tiež hladiny zápalových cytokínov a markerov oxidačného stresu a zároveň podporil antioxidačnú obranu organizmu. Ďalšie testovanie in vitro na ľudských pľúcnych bunkách potvrdilo schopnosť GHK-Cu zmierňovať oxidačný stres, čo naznačuje jeho účinnosť pri liečbe emfyzému [10]. Tieto výsledky zdôrazňujú potenciál GHK-Cu ako terapeutického prístupu k CHOCHP, najmä pri liečbe emfyzému vyvolaného cigaretovým dymom prostredníctvom jeho kombinovaných protizápalových a antioxidačných účinkov.

Okrem toho ďalšia štúdia ukázala, že peptid GHK-Cu pomáha riešiť dysfunkciu kostrového svalstva spojenú s chronickou obštrukčnou chorobou pľúc. Výsledky ukázali, že liečba svalových buniek a myší vystavených dymu pomocou GHK-Cu pomohla znížiť degradáciu svalov spôsobenú vystavením dymu. Okrem toho liečba GHK-Cu zlepšila funkciu svalov a znížila príznaky rozpadu svalov aktiváciou špecifických dráh, ktoré chránia pred degradáciou svalov a posilňujú antioxidačnú obranu [11]. Tieto zistenia zdôrazňujú potenciál GHK-Cu ako terapeutického prostriedku, ktorý pomáha zvládnuť svalovú dysfunkciu u pacientov s CHOCHP. V inej štúdii trvalej obštrukcie prietoku vzduchu (FAO), stavu často pozorovaného pri ťažkej astme, liečba GHK-Cu významne znížila zjazvenie dýchacích ciest, sekréciu hlienu a ďalšie zmeny súvisiace s FAO. Tieto výhody sú do veľkej miery spôsobené schopnosťou GHK-Cu znižovať faktory podporujúce zápal posilnením funkcie SIRT1, proteínu, ktorý pomáha chrániť bunky pred poškodením [12]. Táto štúdia naznačuje, že GHK-Cu môže byť sľubným liekom na zníženie remodelácie dýchacích ciest pri astme, čo môže potenciálne zlepšiť funkciu pľúc a príznaky u pacientov s FAO.

GHK-Cu peptid na podporu hojenia štepu pri rekonštrukcii ACL

Proces hojenia štepu po rekonštrukcii predného skríženého väzu (ACLR) je dôležitý, pretože významne ovplyvňuje úspech a trvanlivosť operácie. Vedecká štúdia skúmala účinok peptidu GHK-Cu na hojenie štepu pri ACLR. Experimentu sa zúčastnilo sedemdesiatdva potkanov rozdelených do troch skupín, z ktorých každá dostala inú liečbu: fyziologický roztok, nízku dávku GHK-Cu (0,3 mg/ml) a vysokú dávku GHK-Cu (3 mg/ml). Od druhého týždňa po operácii sa liečba podávala každý týždeň počas štyroch týždňov. Prvé výsledky po šiestich týždňoch ukázali, že skupiny liečené GHK-Cu vykazovali výrazne menšie ochabnutie kolena ako skupina s fyziologickým roztokom, čo svedčí o väčšej stabilite kĺbu. Tieto rozdiely sa však po 12 týždňoch vytratili, bez trvalej výhody v stabilite kĺbu, tuhosti štepu alebo iných meraných parametroch. To naznačuje, že hoci GHK-Cu môže dočasne zlepšiť hojenie po ACLR, jeho výhody po ukončení liečby nepretrvávajú [13].

Zlepšenie resurfacingu kože pomocou peptidu GHK-Cu (štúdia na ľuďoch)

V prípadovej štúdii bola kozmetická zmes obsahujúca GHK-Cu, kyselinu oligo-hyalurónovú, extrakt z rodiolaru, kyselinu tranexámovú a β-glukán aplikovaná pomocou zariadenia Jet-M 59-ročnému mužovi v sérii týždenných sedení počas troch mesiacov [14]. Dôležité je, že

Zákrok si nevyžadoval anestéziu a bol bezbolestný. Výsledkom bolo viditeľné zlepšenie štruktúry pokožky a zmenšenie vrások v okolí ošetrovaných očí, čo potvrdili aj klinické fotografie. Okrem toho biopsie kože z ošetrených a neošetrených oblastí preukázali zvýšenú produkciu kolagénu v ošetrenej koži. Okrem toho sa pozorovali aj zvýšené hladiny kolagénu IV, fibrilínu-1, prokolagénu typu 1 a tropoelastínu, čo svedčí o zvýšenej syntéze štrukturálnych bielkovín v pokožke. Dôležité je, že počas ošetrenia ani po ňom sa nevyskytli žiadne nežiaduce reakcie, čo dokazuje bezpečnosť a účinnosť kombinácie GHK-Cu s technológiou Jet-M na kozmetické zlepšenie pleti.

Zvýšenie syntézy glykozaminoglykánu peptidom GHK-Cu

V štúdii boli fibroblasty ošetrené rôznymi koncentráciami peptidu GHK-Cu. Výskumníci sledovali syntézu glykozaminoglykánov meraním inkorporácie rádioaktívne označeného glukozamínu a sulfátu do glykozaminoglykánov odobratých z kultivačného média a bunkovej vrstvy. Výsledky ukázali, že GHK-Cu stimuluje syntézu glykozaminoglykánov v závislosti od dávky, pričom najväčší nárast bol pri veľmi nízkych koncentráciách (10^(-9) až 10^(-8) M). Nad týmito koncentráciami sa úroveň syntézy glykozaminoglykánu vrátila na úroveň pozorovanú v kontrolných kultúrach bez liečby [15]. Ďalšia analýza typov glykozaminoglykánov ukázala, že GHK-Cu zvýšil najmä produkciu dermatan sulfátu v extracelulárnom priestore a heparan sulfátu v bunkovej vrstve. Zaujímavé je, že syntéza kyseliny hyalurónovej nebola ovplyvnená.

GHK-Cu peptid ako aktivátor obnovy rán

Počas modelu ranovej komory in vivo na potkanoch boli pod kožu implantované valce zo sieťoviny z nehrdzavejúcej ocele, aby sa simulovalo kontrolované prostredie rany. Potkanom bol do týchto komôr podávaný fyziologický roztok (kontrola) alebo GHK-Cu. Na konci experimentu sa v komorách vyšetrili rôzne biomarkery svedčiace o hojení vrátane celkového proteínu, kolagénu a glykozaminoglykánov [16]. Štúdia ukázala, že GHK-Cu významne zvýšil suchú hmotnosť, DNA, celkový proteín a najmä kolagén v liečených komorách v porovnaní s kontrolnou skupinou. Zvýšenie kolagénu bolo výrazne dvojnásobné v porovnaní s nekolagénovými bielkovinami. Tieto zistenia preukázali, že GHK-Cu zohráva významnú úlohu pri podpore syntézy kľúčových zložiek extracelulárnej matrix potrebných na hojenie rán. Pozorovalo sa aj výrazné zvýšenie typov produkovaného kolagénu a nápadná akumulácia dermatan sulfátu, hoci nedošlo k zmene hladín mRNA TGF-beta. Tieto výsledky rozhodne

potvrdzujú účinnosť GHK-Cu pri zvyšovaní akumulácie základných zložiek matrixu v ranách.

GHK-Cu peptid v prevencii porúch pamäti spôsobených spánkovou depriváciou

Nedostatok spánku môže zhoršiť pamäť a prispieť k neurodegeneratívnym ochoreniam tým, že vyvoláva zápal a poškodenie buniek. V štúdii zameranej na skúmanie potenciálu peptidu GHK-Cu proti poruchám pamäti u myší sa zistili významné výsledky. Myši liečené GHK nevykazovali deficity v učení pozorované v kontrolnej skupine, ktorá dostávala fyziologický roztok. GHK navyše účinne znižoval hladiny MCP-1 a nitrotyrozínu v hipokampe - markerov spojených so zápalom, resp. bunkovým stresom. Znížením týchto markerov GHK pomohol chrániť pred zhoršením kognitívnych funkcií, ktoré zvyčajne spôsobuje krátkodobá spánková deprivácia, a to tým, že sa zameral na základné zápalové procesy a oxidačný stres [17]. Tieto zistenia poukazujú na potenciál GHK ako terapeutického prostriedku v neuroprotekcii a zdôrazňujú jeho význam pri udržiavaní učenia a pamäti za nepriaznivých podmienok.

GHK-Cu peptid na zníženie kognitívnych funkcií súvisiacich s vekom

GHK-Cu bol identifikovaný ako potenciálna liečba kognitívnych porúch spojených so starnutím. V štúdii na starých myšiach C57BL/6 sa GHK-Cu podával intranazálne v dávke 15 mg/kg denne počas dvoch mesiacov s cieľom vyhodnotiť jeho účinky na kognitívne funkcie [18]. Výsledky ukázali, že liečené myši vykazovali významné zlepšenie v úlohách merajúcich priestorovú pamäť a navigáciu v porovnaní s kontrolnou skupinou, ktorá dostávala fyziologický roztok. Vykazovali aj nižšiu úroveň neurozápalu a axonálneho poškodenia, čo poukazuje na neuroprotektívne vlastnosti GHK-Cu. Tieto výsledky poukazujú na schopnosť GHK-Cu zvýšiť odolnosť mozgu voči účinkom starnutia a naznačujú ďalšie možnosti výskumu. Použitie intranazálneho podávania, najmä prostredníctvom rozprašovača, poskytuje praktickú metódu podávania tohto peptidu v predklinických aj potenciálnych klinických podmienkach.

GHK-Cu peptid v liečbe neurodegeneratívnych ochorení

Neurodegenerácia, ktorá sa vyznačuje progresívnou neuronálnou dysfunkciou a úbytkom kognitívnych funkcií, je veľkou výzvou najmä u starších ľudí. V štúdii bol peptid GHK-Cu podávaný transgénnym myšiam 5xFAD, ktoré sa bežne používajú v

Alzheimerovej choroby od 4 mesiacov veku [19]. Myši s Alzheimerovou chorobou dostávali intranazálne dávky GHK-Cu v dávke 15 mg/kg trikrát týždenne počas troch mesiacov. Zistilo sa, že liečba oddiali kognitívne poruchy, zníži tvorbu amyloidných plakov a zníži zápal v dôležitých oblastiach mozgu, ako je frontálna kôra a hipokampus. Tieto predbežné výsledky podporujú ďalší výskum potenciálu GHK-Cu ako účinného neuroterapeutického prostriedku pri Alzheimerovej chorobe, zameraného na viaceré aspekty patológie ochorenia. Okrem toho peptid GHK-Cu moduluje expresiu génov, čím potenciálne resetuje expresiu starých a chorých génov do zdravšieho stavu. Táto schopnosť sa preukázala v štúdiách s využitím mapy konektivity Broad Institute, ktoré odhalili významný účinok GHK na expresiu génov dôležitých pre zdravie neurónov. GHK podporuje syntézu kolagénu, angiogenézu a vykazuje protizápalové a neuroprotektívne účinky, ktoré môžu zmierniť príznaky neurodegeneratívnych ochorení [20]. Okrem toho oxidačný stres, narušená homeostáza medi a zápal v dôsledku nadbytku prozápalových cytokínov sú kľúčovými faktormi neurodegeneratívnych ochorení súvisiacich s vekom. Úloha škodlivých epigenetických zmien pri starnutí ďalej zdôrazňuje potrebu intervencií zameraných na tieto dráhy. Zlúčeniny, ako napríklad peptid GHK-Cu, ktoré môžu obnoviť rovnováhu medi, znížiť zápal a zlepšiť funkciu génov, sa považujú za sľubné riešenia na prevenciu úbytku kognitívnych funkcií a liečbu neurodegeneratívnych porúch [21]. Neurodegeneratívne ochorenia sú navyše často spojené s oxidačným stresom, zápalom a abnormálnym skladaním proteínov, ktoré zhoršuje nadbytok iónov kovov, ako sú meď a zinok, ktoré podporujú agregáciu proteínov a bunkovú toxicitu. GHK-Cu preukázal potenciál proti oxidačnému stresu a chráni pred bunkovou smrťou a agregáciou proteínov spôsobenou týmito kovmi. Štúdie ukázali, že GHK nielenže inhibuje, ale dokáže zvrátiť agregáciu bielkovín, ako napríklad agregáciu pozorovanú pri hovädzom sérovom albumíne (BSA) v zápalových podmienkach. Znižuje tiež zvýšenú toxicitu zlúčenín, ako je napríklad paraquat, v kombinácii s meďou [22]. Tieto vlastnosti robia z GHK sľubného kandidáta na ďalší výskum jeho ochranných schopností proti toxicite kovov a jeho terapeutického potenciálu pri liečbe neurodegeneratívnych ochorení.

GHK peptid v liečbe komplikácií diabetu

Pacienti s cukrovkou sa často stretávajú s pomalším hojením rán v dôsledku dlhodobo vysokej hladiny cukru v krvi, ktorá zhoršuje funkciu bielych krviniek a vedie k nedostatku živín v bunkách, čo zvyšuje riziko infekcie. W

V štúdii sa testoval nový prístup využívajúci biotinylovaný peptid GHK (BioGHK) v kombinácii s kolagénom (označovaný ako Peptide Incorporated Collagen-PIC) na zlepšenie hojenia rán u potkanov s cukrovkou. V štúdii sa porovnávali potkany s cukrovkou liečené PIC s potkanmi so štandardným kolagénovým filmom (CF) a neliečenou skupinou. V štúdii sa merala rýchlosť uzatvárania rán a biochemické zloženie hojiaceho sa tkaniva vrátane hladín kolagénu, kyseliny urónovej, proteínov a DNA. Sledoval sa aj oxid dusnatý a kožné antioxidanty, ako je glutatión (GSH) a kyselina askorbová. Výsledky ukázali, že skupina PIC sa hojila podstatne rýchlejšie a mala lepšie hladiny antioxidantov v porovnaní s kontrolnou skupinou aj skupinou CF. Ďalšie testy in vitro ukázali, že PIC podporuje rast fibroblastov, ktorý je nevyhnutný pre obnovu kože. Histologické vyšetrenie tiež ukázalo lepšiu obnovu tkaniva, viac kolagénu a aktívnu účasť fibroblastov a mastocytov v ranách ošetrených PIC, čo podporuje použitie kolagénu BioGHK na zlepšenie hojenia diabetických rán [23].

GHK-Cu peptid na diabetické neuropatické vredy (štúdia na ľuďoch)

V ďalšej komplexnej klinickej štúdii sa testovala bezpečnosť a účinnosť komplexu glycyl-L-histidyl-L-lyzínu a medi (známeho ako lamin Gel) na neuropatické vredy súvisiace s cukrovkou. Účastníci štúdie dostávali štandardnú starostlivosť o rany, ktorá zahŕňala dôkladné čistenie rán, každodenné ošetrovanie liekom, používanie špecializovanej obuvi na zníženie tlaku a vzdelávanie o starostlivosti o diabetikov. Štúdia ukázala, že používanie gélu Lamin Gel významne zlepšilo hojenie vredov na nohách s mediánom uzavretia plochy 98,5% v porovnaní so 60,8% v skupine s placebom. Gél bol obzvlášť účinný pri liečbe väčších vredov a vykazoval vyššie percento uzavretia rany. Liečba gélom Lamin viedla aj k výrazne nižšej miere infekcií v porovnaní s placebovou skupinou, čo poukazuje na jeho potenciál nielen pri urýchľovaní hojenia, ale aj pri prevencii ďalších komplikácií. Tieto výsledky zdôrazňujú sľubnosť Lamin Gelu ako účinnej možnosti liečby neuropatických vredov súvisiacich s cukrovkou, ktorá svojou účinnosťou prekonáva štandardnú starostlivosť [24]. Okrem toho sa v predbežnej štúdii skúmal účinok chelátu medi glycyl-L-histidyl-L-lyzínu (GHK), konkrétne liečby Lamin®, na hojenie diabetických vredov. V tejto otvorenej štúdii v počiatočnej fáze sa použili rôzne koncentrácie tripeptidového chelátu medi GHK-L-histidyl-L-L-lyzínu (PC1020) na posúdenie jeho účinnosti pri hojení rán. Diabetické vredy boli liečené injekciami s koncentráciou 0,03%, 0,3% alebo 3,0% PC1020 alebo fyziologickým roztokom priamo do vredov počas dvoch týždňov. Štúdia ukázala, že skupina liečená 0,3% PC1020 mala v porovnaní so skupinou liečenou fyziologickým roztokom výrazne lepšiu mieru uzatvárania rán, pričom bolo viditeľné zlepšenie

zahojený povrch rany na konci liečby a obdobia sledovania. Tieto výsledky naznačujú, že chelát medi GHK môže byť sľubným terapeutickým prostriedkom na liečbu diabetických vredov [25].

GHK pri intracerebrálnom krvácaní

Intracerebrálne krvácanie (ICH) je závažný typ cievnej mozgovej príhody, ktorý je známy vysokou úmrtnosťou a invaliditou. Vedecká štúdia skúmala účinnosť peptidu GHK-Cu pri liečbe ICH. GHK podávaný v dávkach 5 a 10 μg/g potkanom postihnutým ICH preukázal významné zlepšenie neurologického zotavenia. Dôkazom toho bolo zníženie opuchu mozgu, zlepšenie neurologickej výkonnosti a vyššia miera prežitia neurónov. Výskumníci tiež zistili zvýšenú integritu neurónov. Okrem toho GHK znížil zápal a upravil hladiny kľúčových enzýmov podieľajúcich sa na udržiavaní extracelulárnej matrix, čo je dôležité pre zníženie sekundárneho poškodenia po ICH. V štúdii sa tiež uvádza, že účinok GHK je čiastočne sprostredkovaný cestou PI3K/AKT. Tieto zistenia naznačujú, že GHK môže byť inovatívnou terapeutickou stratégiou na zlepšenie výsledkov u pacientov trpiacich ICH [26].

Topický peptid GHK-Cu pri hojení ischemických rán

Výskumníci skúmali terapeutické účinky lokálneho komplexu glycyl-L-histidyl-L-lyzínu a medi (TCC; Iamin 2% Gel) na ischemické rany u dvadsiatich štyroch dospelých samcov potkanov Sprague-Dawley. Potkany boli rozdelené do troch skupín: jedna skupina bola lokálne ošetrená TCC, jedna skupina nosičom TCC (gélový základ) a kontrolná skupina, ktorá nedostala žiadnu liečbu. Po 13 dňoch sa v skupine liečenej TCC preukázalo výrazne rýchlejšie zmenšenie veľkosti rany v porovnaní s vehikulom a kontrolnou skupinou. Na konci štúdie sa plocha rany v skupine s TCC zmenšila približne o 64,5%, čo je výrazne viac ako 45,6% v skupine s vehikulom a 28,2% v kontrolnej skupine. Okrem toho biopsie ukázali, že rany ošetrené TCC mali výrazne nižšie hladiny zápalových markerov a enzýmov spojených s rozpadom tkaniva ako kontrolné rany. Tieto zistenia poukazujú na potenciál lokálnej liečby TCC výrazne urýchliť hojenie ischemických rán [27].

GHK peptid na ochranu srdca

Vo vedeckej štúdii sa rekombinantný peptid GHK testoval na modeli zebry s cieľom posúdiť jeho potenciál zmierniť kardiotoxické účinky vyvolané expozíciou medi. Je pozoruhodné, že už pri minimálnej koncentrácii 1 nM komplexy GHK-Cu významne znížili príznaky kardiotoxicity, ako je pomalá srdcová frekvencia a

nepravidelný srdcový rytmus bez ovplyvnenia iných srdcových funkcií u lariev zebričiek vystavených Cu(II). Štúdia ukázala, že rekombinantné tripeptidy GHK majú vysokú afinitu k iónom medi a môžu účinne chrániť pred kardiotoxicitou vyvolanou meďou bez zmeny iných kardiovaskulárnych parametrov. Táto štúdia naznačuje, že tieto špeciálne vyrobené peptidy GHK môžu byť novým spôsobom liečby alebo prevencie poškodenia srdca spôsobeného toxicitou medi [28].

Komplex 5-ALA a GHK peptidov v liečbe alopécie areata (štúdia na ľuďoch)

Vedecká štúdia sa zaoberala novou liečbou mužskej plešatosti, ktorá kombinuje kyselinu 5-aminolevulovú (5-ALA) s peptidom GHK v prípravku s názvom ALAVAX. V šesťmesačnej klinickej štúdii, ktorej sa zúčastnilo štyridsaťpäť mužov, boli účastníci rozdelení do troch skupín. Každá skupina denne používala rôzne koncentrácie lieku ALAVAX alebo placeba. Výsledky ukázali, že skupina, ktorá používala strednú koncentráciu lieku ALAVAX (50 mg/ml), zaznamenala po šiestich mesiacoch významné zvýšenie počtu vlasov v porovnaní so skupinami, ktoré používali vyššiu koncentráciu alebo placebo [29]. Okrem toho pacienti uvádzali vysokú spokojnosť s liečbou, najmä tí, ktorí používali vyššiu koncentráciu lieku ALAVAX, hoci medzi skupinami neboli zaznamenané žiadne významné zmeny v dĺžke alebo hrúbke vlasov. Dôležité je, že žiadny z účastníkov nehlásil nežiaduce účinky, čo poukazuje na bezpečnosť liečby. To naznačuje, že kombinácia 5-ALA a peptidu GHK môže byť sľubnou novou možnosťou liečby vypadávania vlasov bez toho, aby spôsobovala vedľajšie účinky.

Kozmetické účinky peptidu GHK-Cu (prehľad štúdií na ľuďoch)

Viaceré štúdie ukázali, že peptid GHK-Cu môže výrazne zlepšiť vzhľad starnúcej pokožky [30]. Napríklad v jednej štúdii 71 žien používalo krém na tvár s GHK-Cu počas 12 týždňov. Všimli si, že ich pleť sa stala silnejšou a hustejšou, menej ochabnutou, čistejšou a hladšou, s menším počtom jemných liniek a vrások. V inej štúdii 41 žien používalo očný krém s GHK-Cu počas 12 týždňov. Tento krém fungoval lepšie ako placebo a krém s vitamínom K pri znižovaní výskytu liniek a vrások, zlepšovaní vzhľadu pokožky a zvyšovaní hustoty a hrúbky pokožky okolo očí. GHK-Cu sa testoval aj na pokožke stehien účastníčok počas 12 týždňov, kde zvýšil tvorbu kolagénu u 70% žien, čo bolo lepšie ako používanie krémov s vitamínom C alebo kyselinou retinovou. Používanie krému GHK-Cu dvakrát denne počas 12 týždňov zlepšilo ochabnutosť, čistotu, pevnosť a celkový vzhľad pokožky a zároveň stimulovalo rast kožných buniek. Pilotná štúdia potvrdila

tieto výhody, pričom sa uvádza, že lokálna aplikácia komplexov meďnatých tripeptidov zlepšuje hrúbku, hydratáciu, elasticitu a produkciu kolagénu, čo vedie k hladšej a rovnomernejšej pokožke. Okrem toho klinická štúdia so ženami, ktoré používali GHK-Cu v nanolipidových nosičoch dvakrát denne počas ôsmich týždňov, preukázala výrazné zníženie objemu a hĺbky vrások, pričom dosiahla lepšie výsledky ako kontrolné séra a ďalší populárny výrobok proti starnutiu, Matrixyl® 3000. Tieto zistenia zdôrazňujú potenciál peptidu GHK-Cu ako účinnej zložky starostlivosti o pleť proti starnutiu [30].

Odkazy

1.     Pickart L. Ľudský tri-peptid GHK a remodelácia tkanív. J Biomater Sci Polym Ed. 2008;19(8):969-88. doi: 10.1163/156856208784909435. PMID: 18644225. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18644225/

2.     Kang YA, Choi HR, Na JI, Huh CH, Kim MJ, Youn SW, Kim KH, Park KC. Meď-GHK zvyšuje expresiu integrínov a pozitivitu p63 v keratinocytoch. Arch Dermatol Res. 2009 Apr;301(4):301-6. doi: 10.1007/s00403-009-0942-x. Epub 2009 Mar 25. PMID: 19319546. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19319546/

3.     Wang X, Liu B, Xu Q, Sun H, Shi M, Wang D, Guo M, Yu J, Zhao C, Feng B. GHK-Cu-lipozómy urýchľujú hojenie popálenín u myší podporou bunkovej proliferácie a angiogenézy. Wound Repair Regen. 2017 Apr;25(2):270-278. doi: 10.1111/wrr.12520. epub 2017 Apr 27. PMID: 28370978. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28370978/

4.     Siméon A, Monier F, Emonard H, Gillery P, Birembaut P, Hornebeck W, Maquart FX. Expresia a aktivácia matrixových metaloproteináz v ranách: modulácia komplexom tripeptid-meď glycyl-L-histidyl-L-lyzín-Cu2+. J Invest Dermatol. 1999 Jun;112(6):957-64. doi: 10.1046/j.1523-1747.1999.00606.x. PMID: 10383745. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10383745/

5.     Siméon A, Wegrowski Y, Bontemps Y, Maquart FX. Expresia glykozaminoglykánov a malých proteoglykánov v ranách: modulácia komplexom tripeptid-meď glycyl-L-histidyl-L-lyzín-Cu(2+). J Invest Dermatol. 2000 Dec;115(6):962-8. doi: 10.1046/j.1523-1747.2000.00166.x. PMID: 11121126. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11121126/

6.     Pickart L, Vasquez-Soltero JM, Margolina A. Peptid GHK ako prirodzený modulátor viacerých bunkových dráh pri regenerácii kože. Biomed Res Int. 2015;2015:648108. doi: 10.1155/2015/648108. epub 2015 Jul 7. PMID: 26236730; PMCID: PMC4508379. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26236730/

7.     Ma WH, Li M, Ma HF, Li W, Liu L, Yin Y, Zhou XM, Hou G. Ochranné účinky GHK-Cu pri bleomycínom indukovanej pľúcnej fibróze prostredníctvom antioxidačného stresu a protizápalových ciest. Life Sci. 2020 Jan 15;241:117139. doi: 10.1016/j.lfs.2019.117139. epub 2019 Dec 4. PMID: 31809714. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31809714/

8.     Zhou XM, Wang GL, Wang XB, Liu L, Zhang Q, Yin Y, Wang QY, Kang J, Hou G. Peptid GHK inhibuje bleomycínom indukovanú pľúcnu fibrózu u myší potlačením epitelového až mezenchýmového prechodu sprostredkovaného TGFβ1/Smad. Front Pharmacol. 2017 Dec 12;8:904. doi: 10.3389/fphar.2017.00904. PMID: 29311918; PMCID: PMC5733019. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29311918/

9.     Park JR, Lee H, Kim SI, Yang SR. Tri-peptidový komplex GHK-Cu zlepšuje akútne poškodenie pľúc vyvolané lipopolysacharidom u myší. Oncotarget. 2016 Sep 6;7(36):58405-58417. doi: 10.18632/oncotarget.11168. PMID: 27517151; PMCID: PMC5295439. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27517151/

10.  Zhang Q, Yan L, Lu J, Zhou X. Glycyl-L-histidyl-L-lyzín-Cu²⁺ zmierňuje pľúcny emfyzém a zápal vyvolaný cigaretovým dymom znížením oxidačného stresu. Front Mol Biosci. 2022 Jul 22;9:925700. doi: 10.3389/fmolb.2022.925700. PMID: 35936787; PMCID: PMC9354777. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35936787/

11.  Deng M, Zhang Q, Yan L, Bian Y, Li R, Gao J, Wang Y, Miao J, Li J, Zhou X, Hou G. Glycyl-l-histidyl-l-lyzín-Cu²⁺ zachraňuje dysfunkciu kostrového svalstva spôsobenú fajčením cigariet prostredníctvom cesty závislej od sirtuínu 1. J Cachexia Sarcopenia Muscle. 2023 Jun;14(3):1365-1380. doi: 10.1002/jcsm.13213. epub 2023 Mar 10. PMID: 36905132; PMCID: PMC10235902. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36905132/

12.  Zhang Q, Liu J, Deng MM, Tong R, Hou G. Zmiernenie remodelácie dýchacích ciest vyvolanej ovalbumínom pomocou glycyl-l-histidyl-l-lyzínu-Cu²⁺ tripeptidového komplexu prostredníctvom aktivácie SIRT1 v epitelových bunkách dýchacích ciest. Biomed Pharmacother. 2023 Aug;164:114936. doi: 10.1016/j.biopha.2023.114936. epub 2023 May 29. PMID: 37257226. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37257226/

13.  Fu SC, Cheuk YC, Chiu WY, Yung SH, Rolf CG, Chan KM. Komplex tripeptidu a medi GHK-Cu (II) prechodne zlepšil výsledky hojenia na modeli rekonštrukcie ACL u potkanov. J Orthop Res. 2015 Jul;33(7):1024-33. doi: 10.1002/jor.22831. epub 2015 Apr 10. PMID: 25731775. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25731775/

14.  Byun SY, Chae JB, Na JI, Park KC. Výrazné zlepšenie kurích ôk po liečbe Jet-M a zmiešaným roztokom medi-GHK, oligo-hyalurónovej kyseliny, rodiolárového extraktu, kyseliny tranexámovej a β-glukánu (GHR formulácia). J Cosmet Laser Ther. 2016 Oct;18(5):293-5. doi: 10.3109/14764172.2016.1157367. epub 2016 May 26. PMID: 27064823. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27064823/

15.  Wegrowski Y, Maquart FX, Borel JP. Stimulácia syntézy sulfátového glykozaminoglykánu komplexom tripeptid-meď glycyl-L-histidyl-L-lyzín-Cu2+. Life Sci. 1992;51(13):1049-56. doi: 10.1016/0024-3205(92)90504-i. PMID: 1522753. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1522753/

16.  Maquart FX, Bellon G, Chaqour B, Wegrowski J, Patt LM, Trachy RE, Monboisse JC, Chastang F, Birembaut P, Gillery P, et al. In vivo stimulácia akumulácie spojivového tkaniva komplexom tripeptid-meď glycyl-L-histidyl-L-lyzín-Cu2+ v experimentálnych ranách potkanov. J Clin Invest. 1993 Nov;92(5):2368-76. doi: 10.1172/JCI116842. PMID: 8227353; PMCID: PMC288419.  https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8227353/

17.  Rosenfeld M, Nickel K, Ladiges W. GHK peptid zabraňuje poruchám učenia počas spánku u starnúcich myší. Aging Pathobiol Ther. 2023;5(1):33-35. doi: 10.31491/apt.2023.03.109. epub 2023 Mar 29. PMID: 37035833; PMCID: PMC10081520. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37035833/

18.  Tucker M, Keely A, Park JY, Rosenfeld M, Wezeman J, Mangalindan R, Ratner D, Ladiges W. Intranazálny peptid GHK zvyšuje odolnosť voči poklesu kognitívnych funkcií u starnúcich myší. bioRxiv [Preprint]. 2023 Nov 17:2023.11.16.567423. doi: 10.1101/2023.11.16.567423. PMID: 38014118; PMCID: PMC10680828. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38014118/

19.  Tucker M, Liao GY, Park JY, Rosenfeld M, Wezeman J, Mangalindan R, Ratner D, Darvas M, Ladiges W. Behaviorálne a neuropatologické znaky Alzheimerovej choroby sú oslabené u myší 5xFAD liečených intranazálnym peptidom GHK. bioRxiv [Preprint]. 2023 Nov 21:2023.11.20.567908. doi: 10.1101/2023.11.20.567908. PMID: 38045355; PMCID: PMC10690187. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38045355/

20.  Pickart L, Vasquez-Soltero JM, Margolina A. Vplyv ľudského peptidu GHK na expresiu génov súvisiacich s funkciou nervového systému a kognitívnym poklesom. Brain Sci. 2017 Feb 15;7(2):20. doi: 10.3390/brainsci7020020. PMID: 28212278; PMCID: PMC5332963. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28212278/

21.  Pickart L, Vasquez-Soltero JM, Margolina A. Ľudský tripeptid GHK-Cu v prevencii oxidačného stresu a degeneratívnych stavov starnutia: dôsledky pre kognitívne zdravie. Oxid Med Cell Longev. 2012;2012:324832. doi: 10.1155/2012/324832. epub 2012 May 10. PMID: 22666519; PMCID: PMC3359723. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22666519/

22.  Min JH, Sarlus H, Harris RA. Glycyl-L-histidyl-L-lyzín (GHK) zabraňuje meďou a zinkom indukovanej agregácii proteínov a odumieraniu buniek CNS in vitro. Metallomics. 2024 Apr 10:mfae019. doi: 10.1093/mtomcs/mfae019. Epub pred tlačou. PMID: 38599632. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38599632/

23.  Arul V, Kartha R, Jayakumar R. Terapeutický prístup k hojeniu diabetických rán pomocou biotinylovaných GHK inkorporovaných do kolagénových matríc. Life Sci. 2007 Jan 2;80(4):275-84. doi: 10.1016/j.lfs.2006.09.018. epub 2006 Sep 23. PMID: 17049946. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17049946/

24.  Mulder GD, Patt LM, Sanders L, Rosenstock J, Altman MI, Hanley ME, Duncan GW. Zlepšené hojenie vredov u pacientov s diabetom lokálnou liečbou glycyl-l-histidyl-l-lyzínom meďnatým. Wound Repair Regen. 1994 Oct;2(4):259-69. doi: 10.1046/j.1524-475X.1994.20406.x. PMID: 17147644. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17147644/

25.  Massey, P., Patt, L.M. a D'Aoust, J.C., 1998. Účinok glycyl-L-histidyl-L-lyzínového chelátu medi na hojenie diabetických vredov: pilotná štúdia. Rany, 4(1), s. 21-8. Odkaz na štúdiu

26.  Zhang H, Wang Y, Lian L, Zhang C, He Z. Glycín-histidín-lyzín (GHK) zmierňuje poškodenie astrocytov pri intracerebrálnom krvácaní prostredníctvom dráhy Akt/miR-146a-3p/AQP4. Front Neurosci. 2020 Oct 28;14:576389. doi: 10.3389/fnins.2020.576389. PMID: 33192260; PMCID: PMC7658812. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33192260/

27.  Canapp SO Jr, Farese JP, Schultz GS, Gowda S, Ishak AM, Swaim SF, Vangilder J, Lee-Ambrose L, Martin FG. Účinok lokálneho komplexu tripeptid-meď na hojenie ischemických otvorených rán. Vet Surg. 2003 Nov-Dec;32(6):515-23. doi: 10.1111/j.1532-950x.2003.00515.x. PMID: 14648529. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14648529/

28.  Hsiao CD, Wu HH, Malhotra N, Liu YC, Wu YH, Lin YN, Saputra F, Santoso F, Chen KH. Expresia a purifikácia rekombinantných GHK tripeptidov je schopná chrániť pred akútnou kardiotoxicitou z expozície vode-meď u zebričiek. Biomolecules. 2020 Aug 19;10(9):1202. doi: 10.3390/biom10091202. PMID: 32825031; PMCID: PMC7564529. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32825031/

29.  Lee WJ, Sim HB, Jang YH, Lee SJ, Kim do W, Yim SH. Účinnosť komplexu kyseliny 5-aminolevulovej a glycyl-histidyl-lyzínového peptidu na rast vlasov. Ann Dermatol. 2016 Aug;28(4):438-43. doi: 10.5021/ad.2016.28.4.438. epub 2016 Jul 26. PMID: 27489425; PMCID: PMC4969472. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27489425/

30.  Pickart, L. a Margolina, A., 2018. Regeneračné a ochranné účinky peptidu GHK-Cu vo svetle nových génových údajov. Medzinárodný časopis molekulárnych vied, 19(7), p.1987. https://www.mdpi.com/1422-0067/19/7/1987

Zrieknutie sa zodpovednosti

Tento článok je napísaný s cieľom vzdelávať a zvyšovať povedomie o diskutovanej látke. Je dôležité poznamenať, že diskutovaná látka je látka a nie konkrétny výrobok. Informácie obsiahnuté v texte vychádzajú z dostupných vedeckých štúdií a nie sú určené ako lekárske poradenstvo alebo na podporu samoliečby. Čitateľovi sa odporúča, aby všetky rozhodnutia týkajúce sa zdravia a liečby konzultoval s kvalifikovaným zdravotníckym pracovníkom.